大鼠Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)重組蛋白用于靶蛋白去磷酸化活性檢測、MAPK 通路負(fù)調(diào)控研究,細(xì)胞應(yīng)激、凋亡穩(wěn)態(tài)調(diào)控相關(guān)體外分子實驗。
型號:YS-DB1688
產(chǎn)品名稱:大鼠Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1A(PPM1A)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Protein Phosphatase, Mg2+/Mn2+ Dependent 1A (PPM1A)
PP2C-ALPHA; PP2CA; Phosphatase 2C Alpha; Protein Phosphatase 1A(Formerly 2C)Magnesium-Dependent,Alpha
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:-
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理:

SDS-PAGE 純度檢測:分子量驗證,灰度分析計算目的蛋白純度
BCA 比色定量:分光顯色法,標(biāo)準(zhǔn)曲線測定蛋白濃度
磷酸酶活性檢測:水解磷酸化底物釋放游離磷酸,磷酸顯色定量磷酸酶活力
WB 免疫鑒定:PPM1A 特異性抗體雜交,驗證重組蛋白產(chǎn)物無誤
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常見實驗場景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實驗
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實驗梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時機(jī):細(xì)胞接種后24-48小時,待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實驗
陽性對照設(shè)置:在ELISA或WB實驗中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對:選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實驗
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實驗,優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 大鼠Mg2+/Mn2+依賴性蛋白磷酸酶1;PPM1A;重組蛋白;
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