大鼠N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)重組蛋白進行外源物芳香胺乙?;x酶活檢測,藥物代謝、致癌物解毒、個體化代謝分型體外藥理實驗。
型號:YS-DB1594
產(chǎn)品名稱:大鼠N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant N-Acetyltransferase 2 (NAT2)
AAC2; PNAT; Arylamine N-Acetyltransferase; Arylamide acetylase 2; Polymorphic arylamine N-acetyltransferase
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:60.3kDa
實際分子量:60kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Asp20~Val280 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份:100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液(pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:5.1
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理:

SDS-PAGE 純度分析:電泳判斷條帶純度、雜蛋白、蛋白降解
BCA 定量檢測:銅離子還原顯色,分光法測算重組蛋白濃度
乙酰轉(zhuǎn)移酶活:乙酰 CoA 介導(dǎo)底物乙?;?,產(chǎn)物定量表征 N - 乙酰轉(zhuǎn)移酶催化活性
WB 免疫鑒定:NAT2 特異性抗體雜交,驗證重組蛋白產(chǎn)物無誤
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常見實驗場景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實驗
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實驗梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時機:細(xì)胞接種后24-48小時,待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實驗
陽性對照設(shè)置:在ELISA或WB實驗中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對:選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實驗
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實驗,優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 大鼠N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2;NAT2;重組蛋白;
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