大鼠X-連鎖蛋白激酶(PRKX)重組蛋白開展蛋白絲氨酸 / 蘇氨酸磷酸化活性檢測,生殖發(fā)育調(diào)控、細(xì)胞分化及信號通路穩(wěn)態(tài)相關(guān)體外分子機制實驗。
型號:YS-DB1684
產(chǎn)品名稱:大鼠X-連鎖蛋白激酶(PRKX)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Protein Kinase, X-Linked (PRKX)
PKX1; cAMP-dependent protein kinase catalytic subunit PRKX
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:39.7kDa
實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Trp49~Phe358 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:>90%
等電點:-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理:

SDS-PAGE 純度分析:電泳判斷條帶純度、蛋白降解、雜帶污染
BCA 分光定量:堿性銅顯色反應(yīng),測算重組蛋白濃度
絲蘇氨酸激酶活性:磷酸化特異性多肽底物,比色法檢測磷酸化水平反映激酶活性
Western Blot 驗證:PRKX 特異性抗體識別,確認(rèn)重組蛋白表達(dá)準(zhǔn)確
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復(fù)溶操作要點:

復(fù)溶前準(zhǔn)備
工具消毒:移液槍頭、離心管需經(jīng)過高壓滅菌或一次性無菌處理,避免引入污染。
緩沖液選擇:優(yōu)先使用產(chǎn)品說明書推薦的專用復(fù)溶緩沖液,若無推薦可使用:
基礎(chǔ)型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保護型:在基礎(chǔ)緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢劑(如0.05% Triton X-100),酶類需添加輔酶因子
復(fù)溶步驟
短暫離心:將凍干蛋白管置于離心機,4℃下8000rpm離心30秒,使底部蛋白集中。
緩慢加液:沿管壁緩慢加入適量緩沖液,避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解:輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸,禁止渦旋振蕩(易導(dǎo)致蛋白變性)。
靜置溶解:4℃靜置10-30分鐘,難溶蛋白可延長至1小時,期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關(guān)鍵字: 大鼠X-連鎖蛋白激酶;PRKX;重組蛋白;
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