大鼠γ-分泌激活蛋白(gSAP)重組蛋白用于 γ- 分泌酶復(fù)合物活性調(diào)控研究、淀粉樣前體蛋白剪切分析、阿爾茨海默病相關(guān)分子機(jī)制探究實(shí)驗(yàn)。
型號(hào):YS-DB1778
產(chǎn)品名稱:大鼠γ-分泌激活蛋白(gSAP)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Gamma-Secretase Activating Protein (gSAP)
PION; Pigeon Homolog
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:28.1kDa
實(shí)際分子量:28kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Leu634~Leu846 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):6.1
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理:

純度檢測(cè)(SDS-PAGE):變性電泳分離蛋白,染色觀察主條帶純度,排查降解片段;
分子量驗(yàn)證:電泳遷移值比對(duì)蛋白 Marker,確認(rèn) gSAP 分子量與理論值一致;
濃度定量(BCA 比色):肽鍵還原 Cu2?生成紫色復(fù)合物,吸光度定量蛋白濃度;
功能活性檢測(cè):體外結(jié)合 γ- 分泌酶復(fù)合體,檢測(cè)其促進(jìn)淀粉樣底物切割效率,驗(yàn)證蛋白激活功能。
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不同實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景使用方法:

1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞刺激、增殖、分化、趨化)
用無血清培養(yǎng)基或基礎(chǔ)培養(yǎng)基稀釋蛋白至工作濃度
按所需終濃度直接加入細(xì)胞培養(yǎng)體系
現(xiàn)配現(xiàn)用,避免室溫長(zhǎng)時(shí)間放置降解
設(shè)置空白對(duì)照組、溶劑對(duì)照組
2. 體外酶活 / 結(jié)合實(shí)驗(yàn)(蛋白互作、ELISA、SPR、酶動(dòng)力學(xué))
用匹配 pH、離子強(qiáng)度反應(yīng)緩沖液稀釋
冰上配制,全程低溫減少降解
按體系體積依次加樣,啟動(dòng)反應(yīng),設(shè)置陰性對(duì)照
3. 動(dòng)物體內(nèi)注射(尾靜脈、腹腔、皮下給藥)
復(fù)溶后透析置換為無菌生理鹽水 / PBS,去除緩沖鹽、防腐劑
0.22 μm 過濾除菌,無菌分裝
根據(jù)動(dòng)物體重計(jì)算給藥劑量,現(xiàn)配現(xiàn)用
4. 蛋白免疫(制備抗體)
蛋白與佐劑等體積混勻乳化
多點(diǎn)皮下或肌肉注射免疫動(dòng)物,按免疫程序加強(qiáng)免疫
5. WB / 標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品使用
稀釋成梯度濃度,上樣做標(biāo)準(zhǔn)曲線或陽性對(duì)照
關(guān)鍵字: 大鼠γ-分泌激活蛋白;gSAP;重組蛋白;
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