商品屬性：
產品名稱 | 人B-Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(BRAF)重組蛋白 | 型號 | YS-DB1605 |
物種 | Homo sapiens (Human，人) | 用途 | 僅供科研實驗 |
型號：YS-DB1605
產品名稱：人B-Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶(BRAF)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant B-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (BRAF)
B-raf 1; BRAF1; RAFB1; V-Raf Murine Sarcoma Viral Oncogene Homolog B1
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：：細胞膜, 細胞核, 細胞質
預測分子量：33.4kDa
實際分子量：33kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：Ile457~Leu717 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點：9.5
應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
核心參數：
用于 BRAF 激酶活性檢測、MEK 底物磷酸化實驗、靶向抑制劑篩選及 MAPK 通路體外機制研究。
基礎核心參數
基因 ID：673；Raf 家族激酶，分子量≈84 kDa；RAS-MAPK 通路核心分子，常見 V600E 致癌突變位點。
核心生物功能
MAPK 級聯信號傳導：接收 RAS 上游信號，磷酸化 MEK1/2，逐級激活 ERK1/2，調控細胞增殖、分化、存活與遷移。
腫瘤驅動突變：BRAF V600E 持續(xù)自激活，通路失控，是黑色素瘤、甲狀腺癌、結直腸癌高頻突變靶點，靶向抑制劑臨床應用成熟。
復溶操作要點：
復溶前準備
工具消毒：移液槍頭、離心管需經過高壓滅菌或一次性無菌處理，避免引入污染。
緩沖液選擇：優(yōu)先使用產品說明書推薦的專用復溶緩沖液，若無推薦可使用：
基礎型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保護型：在基礎緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢劑（如0.05% Triton X-100），酶類需添加輔酶因子
復溶步驟
短暫離心：將凍干蛋白管置于離心機，4℃下8000rpm離心30秒，使底部蛋白集中。
緩慢加液：沿管壁緩慢加入適量緩沖液，避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解：輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸，禁止渦旋振蕩（易導致蛋白變性）。
靜置溶解：4℃靜置10-30分鐘，難溶蛋白可延長至1小時，期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
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關鍵字： 人B-Raf原癌基因絲氨酸/蘇氨酸蛋白激;BRAF;重組蛋白;
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