大鼠支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)重組蛋白用于支鏈 α- 酮酸脫氫酶磷酸化調(diào)控、支鏈氨基酸代謝失衡及代謝綜合征相關(guān)酶學(xué)機(jī)制研究。
型號：YS-DB965
產(chǎn)品名稱：大鼠支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)重組蛋白
物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
英文名稱：Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK)
BCKDHKIN; 3-Methyl-2-Oxobutanoate Dehydrogenase/Lipoamide Kinase,Mitochondrial
酶與激酶
物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
來源：原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位：：分泌
預(yù)測分子量：24.5kDa
實際分子量：24kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：Arg44~Thr223 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點：9.0
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
BCKDK 特異性抗體靶向重組蛋白，免疫定性鑒定重組激酶蛋白。
BCKDK 磷酸化修飾支鏈 α- 酮酸脫氫酶復(fù)合體，檢測靶蛋白磷酸化水平定量激酶活性。
BCA 總蛋白定量，歸一化酶活數(shù)據(jù)。
底物空白、無關(guān)絲氨酸激酶對照，排除非特異性蛋白磷酸化干擾。
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復(fù)溶操作要點：
復(fù)溶前準(zhǔn)備
工具消毒：移液槍頭、離心管需經(jīng)過高壓滅菌或一次性無菌處理，避免引入污染。
緩沖液選擇：優(yōu)先使用產(chǎn)品說明書推薦的專用復(fù)溶緩沖液，若無推薦可使用：
基礎(chǔ)型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保護(hù)型：在基礎(chǔ)緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢劑（如0.05% Triton X-100），酶類需添加輔酶因子
復(fù)溶步驟
短暫離心：將凍干蛋白管置于離心機(jī)，4℃下8000rpm離心30秒，使底部蛋白集中。
緩慢加液：沿管壁緩慢加入適量緩沖液，避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解：輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸，禁止渦旋振蕩（易導(dǎo)致蛋白變性）。
靜置溶解：4℃靜置10-30分鐘，難溶蛋白可延長至1小時，期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關(guān)鍵字： 大鼠支鏈α-酮酸脫氫酶;BCKDK;重組蛋白;
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