人3-羥基丁酸脫氫酶1(BDH1)重組蛋白適用于酮體生成代謝檢測、饑餓應(yīng)激代謝、神經(jīng)系統(tǒng)能量代謝及代謝疾病體外靶點(diǎn)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
型號：YS-DB862
產(chǎn)品名稱：人3-羥基丁酸脫氫酶1(BDH1)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant 3-Hydroxybutyrate Dehydrogenase 1 (BDH1)
DBH; SDR9C1; D-beta-Hydroxybutyrate Dehydrogenase,Mitochondrial; Short Chain Dehydrogenase/Reductase Family 9C,Member 1
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位：：分泌
預(yù)測分子量：41.8kDa
實(shí)際分子量：42kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：Met1~Arg343 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀：凍干粉
純度：> 97%
等電點(diǎn)：9.1
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
酮體氧化還原催化：BDH1 催化 3 - 羥基丁酸與乙酰乙酸可逆轉(zhuǎn)化，伴隨 NAD+/NADH 輔酶互變。
340nm 輔酶動態(tài)檢測：NADH 吸光度變化速率直接測定重組 BDH1 酶活性。
酮體產(chǎn)物色譜定量：液相分離定量兩種酮體，計(jì)算重組蛋白催化轉(zhuǎn)化率。
免疫印跡蛋白定量鑒定：抗體檢測重組蛋白濃度、分子量與樣品純度。
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常見實(shí)驗(yàn)場景操作指南：
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。
添加時(shí)機(jī)：細(xì)胞接種后24-48小時(shí)，待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實(shí)驗(yàn)
陽性對照設(shè)置：在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。
抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實(shí)驗(yàn)，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。
反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進(jìn)行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。
陰性對照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字： 人3-羥基丁酸脫氫酶1;BDH1;重組蛋白;
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