人7-脫氫膽固醇還原酶(DHCR7)重組蛋白用于膽固醇合成通路活性檢測(cè)、先天性膽固醇代謝缺陷、脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)調(diào)控體外機(jī)理實(shí)驗(yàn)。
型號(hào)：YS-DB606
產(chǎn)品名稱：人7-脫氫膽固醇還原酶(DHCR7)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant 7-Dehydrocholesterol Reductase (DHCR7)
DHCR-7; SLOS; D7SR; Smith-Lemli-Opitz Syndrome; Putative sterol reductase SR-2; Sterol Delta(7)-reductase
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位：：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔
預(yù)測(cè)分子量：-
實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點(diǎn)：-
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理：
固醇雙鍵還原催化：DHCR7 依賴 NADPH 還原 7 - 脫氫膽固醇雙鍵生成膽固醇，輔酶消耗速率測(cè)酶活。
340nm NADPH 吸光度衰減監(jiān)測(cè)：吸光度下降速率動(dòng)態(tài)定量重組 DHCR7 活性。
氣相色譜固醇產(chǎn)物定量：分離兩種固醇底物產(chǎn)物，計(jì)算重組蛋白催化轉(zhuǎn)化率。
免疫印跡蛋白純度鑒定：特異性抗體驗(yàn)證重組蛋白表達(dá)正確、無降解。
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不同實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景使用方法：
1. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)（細(xì)胞刺激、增殖、分化、趨化）
用無血清培養(yǎng)基或基礎(chǔ)培養(yǎng)基稀釋蛋白至工作濃度
按所需終濃度直接加入細(xì)胞培養(yǎng)體系
現(xiàn)配現(xiàn)用，避免室溫長(zhǎng)時(shí)間放置降解
設(shè)置空白對(duì)照組、溶劑對(duì)照組
2. 體外酶活 / 結(jié)合實(shí)驗(yàn)（蛋白互作、ELISA、SPR、酶動(dòng)力學(xué)）
用匹配 pH、離子強(qiáng)度反應(yīng)緩沖液稀釋
冰上配制，全程低溫減少降解
按體系體積依次加樣，啟動(dòng)反應(yīng)，設(shè)置陰性對(duì)照
3. 動(dòng)物體內(nèi)注射（尾靜脈、腹腔、皮下給藥）
復(fù)溶后透析置換為無菌生理鹽水 / PBS，去除緩沖鹽、防腐劑
0.22 μm 過濾除菌，無菌分裝
根據(jù)動(dòng)物體重計(jì)算給藥劑量，現(xiàn)配現(xiàn)用
4. 蛋白免疫（制備抗體）
蛋白與佐劑等體積混勻乳化
多點(diǎn)皮下或肌肉注射免疫動(dòng)物，按免疫程序加強(qiáng)免疫
5. WB / 標(biāo)準(zhǔn)品、校準(zhǔn)品使用
稀釋成梯度濃度，上樣做標(biāo)準(zhǔn)曲線或陽(yáng)性對(duì)照
關(guān)鍵字： 人7-脫氫膽固醇還原酶;DHCR7;重組蛋白;
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