人胞苷脫氨酶(CDA)重組蛋白可進(jìn)行 CDA 催化活性檢測(cè)、核苷代謝通路研究、化療藥物代謝機(jī)理探究、酶抑制劑篩選及蛋白結(jié)合互作驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
型號(hào):YS-DB1956
產(chǎn)品名稱:人胞苷脫氨酶(CDA)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Cytidine Deaminase (CDA)
CDD; Cytidine aminohydrolase
酶與激酶
血液病學(xué)
遺傳科學(xué)
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:19.9kDa
實(shí)際分子量:17kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)
片段與標(biāo)簽:Ala2~Gln146 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):6.8
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理:

Western Blot 特異性驗(yàn)證:CDA 特異性抗體雜交,確認(rèn)目標(biāo)蛋白表達(dá)、分子量無(wú)誤。
BCA 法精確濃度標(biāo)定:銅離子還原顯色體系,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量蛋白濃度。
脫氨酶酶活檢測(cè):催化胞苷脫氨生成尿苷,紫外分光監(jiān)測(cè)底物吸光度變化,計(jì)算酶催化比活。
動(dòng)態(tài)濁度內(nèi)毒素定量:實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)鱟試劑濁度變化,定量?jī)?nèi)毒素殘留濃度。
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常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測(cè)細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時(shí)機(jī):細(xì)胞接種后24-48小時(shí),待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
陽(yáng)性對(duì)照設(shè)置:在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對(duì):選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測(cè)抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實(shí)驗(yàn),優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對(duì)照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 人胞苷脫氨酶;CDA;重組蛋白;
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