人蛋白激酶D3(PKD3)重組蛋白適用于 PKD3 催化活性測定、細(xì)胞骨架重塑調(diào)控研究、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)信號(hào)通路分析、磷酸化底物篩選與調(diào)節(jié)劑篩選試驗(yàn)。

型號(hào)：YS-DB2287

產(chǎn)品名稱：人蛋白激酶D3(PKD3)重組蛋白

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase D3 (PKD3)

PRKD3; EPK2; PKC-NU; PRKCN; nPKC-NU; Protein Kinase C,Nu

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：29.4kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ile576~Leu832 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：

Western Blot 特異性驗(yàn)證：PKD3 特異性抗體識(shí)別目標(biāo)條帶，確認(rèn)蛋白表達(dá)正確。

Bradford 法批量蛋白濃度測定：染料變色原理定量蛋白樣品。

體外激酶磷酸化活性檢測：以特異性多肽為底物，檢測 ATP 消耗與磷酸化產(chǎn)物生成量表征激酶活力。

凝膠鱟試劑內(nèi)毒素定性定量：滿足細(xì)胞給藥實(shí)驗(yàn)質(zhì)控要求。
公司正在出售的產(chǎn)品：

常見實(shí)驗(yàn)場景操作指南：

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。

添加時(shí)機(jī)：細(xì)胞接種后24-48小時(shí)，待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。

更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。

免疫檢測實(shí)驗(yàn)

陽性對(duì)照設(shè)置：在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保定量準(zhǔn)確性。

封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。

抗體配對(duì)：選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)

標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實(shí)驗(yàn)，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。

反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進(jìn)行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。

陰性對(duì)照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。