人蛋白磷酸酶1催化亞基α亞型(PPP1Ca)重組蛋白用于體外磷酸酶活性分析、底物去磷酸化實驗、細(xì)胞周期與凋亡調(diào)控相關(guān)生化機理研究。
型號:YS-DB2332
產(chǎn)品名稱:人蛋白磷酸酶1催化亞基α亞型(PPP1Ca)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Protein Phosphatase 1, Catalytic Subunit Alpha Isoform (PPP1Ca)
PPP1C-A; PPP1-CA; PP-1A; PPP1A; Serine/Threonine-Protein Phosphatase PP1-Alpha Catalytic Subunit
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測分子量:41.1kDa
實際分子量:41kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ser2~Lys330 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點:5.9
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理:

Western Blot 鑒定:PPP1Ca 特異性抗體特異性識別重組蛋白,條帶分子量匹配理論值,驗證蛋白表達(dá)正確性。
SDS-PAGE 純度分析:電泳分離雜蛋白組分,染色灰度統(tǒng)計目標(biāo)蛋白占比,評估蛋白純化純度。
BCA 法蛋白濃度定量:肽鍵還原 Cu2?顯色,OD 值對標(biāo) BSA 標(biāo)準(zhǔn)曲線,精準(zhǔn)測定蛋白濃度。
絲氨酸 / 蘇氨酸磷酸酶活性檢測:以磷酸化絲 / 蘇氨酸多肽為底物,PPP1Ca 催化脫磷酸,檢測底物去磷酸化速率判定酶活。
公司正在出售的產(chǎn)品:

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常見實驗場景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實驗
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實驗梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時機:細(xì)胞接種后24-48小時,待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測實驗
陽性對照設(shè)置:在ELISA或WB實驗中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對:選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實驗
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實驗,優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 人蛋白磷酸酶1催化亞基α亞型;PPP1Ca;重組蛋白;
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