人二-N-乙酰殼二糖酶(CTBS)重組蛋白用于糖苷水解酶活性檢測(cè)、糖胺聚糖代謝分析、溶酶體貯積癥相關(guān)體外功能研究。
型號(hào):YS-DB954
產(chǎn)品名稱:人二-N-乙酰殼二糖酶(CTBS)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Di-N-Acetyl Chitobiase (CTBS)
CTB
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:42.6kDa
實(shí)際分子量:43kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Glu47~Arg385 with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理:

Western Blot 驗(yàn)證:CTBS 特異性抗體特異性結(jié)合重組蛋白,電泳條帶分子量匹配理論分子量。
SDS-PAGE 純度質(zhì)控:電泳分離雜蛋白,灰度計(jì)算目標(biāo)蛋白純度比例。
BCA 顯色定量蛋白濃度:顯色反應(yīng)定量樣品總蛋白濃度。
糖苷水解酶活性檢測(cè):水解幾丁質(zhì)二糖底物釋放 N - 乙酰氨基葡萄糖,比色法檢測(cè)產(chǎn)物生成量測(cè)定酶活。
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常見實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測(cè)細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時(shí)機(jī):細(xì)胞接種后24-48小時(shí),待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
陽性對(duì)照設(shè)置:在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對(duì):選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測(cè)抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實(shí)驗(yàn),優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對(duì)照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 人二-N-乙酰殼二糖酶;CTBS;重組蛋白;
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