人二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)重組蛋白適用于嘧啶分解代謝酶活檢測、抗腫瘤藥物代謝分型、個體化用藥體外評價實驗。

型號：YS-DB581

產品名稱：人二氫嘧啶脫氫酶(DPYD)重組蛋白

物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Dihydropyrimidine Dehydrogenase (DPYD)

DPD; DHPDHase; Dihydrothymine dehydrogenase; Dihydrouracil dehydrogenase

酶與激酶

代謝通路

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質

預測分子量：30.6kDa

實際分子量：31kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ile781~Cys1025 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：6.4

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：

Western Blot 驗證：DPYD 特異性抗體特異性結合重組蛋白，電泳條帶分子量匹配理論分子量。

SDS-PAGE 純度分析：電泳分離雜質蛋白，灰度統(tǒng)計目標蛋白純度占比。

BCA 比色定量蛋白濃度：還原顯色體系定量樣品濃度。

嘧啶脫氫酶活性檢測：NADPH 依賴還原尿嘧啶、胸腺嘧啶，監(jiān)測輔酶吸光度下降速率測定脫氫酶活性。
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常見實驗場景操作指南：

細胞培養(yǎng)實驗

濃度優(yōu)化：先設置預實驗梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。

添加時機：細胞接種后24-48小時，待細胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。

更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。

免疫檢測實驗

陽性對照設置：在ELISA或WB實驗中，用已知濃度的重組蛋白制備標準曲線，確保定量準確性。

封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結合。

抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標簽產生交叉反應。

蛋白相互作用實驗

標簽選擇：若使用Pull-down實驗，優(yōu)先選擇GST或His標簽的重組蛋白，便于親和層析分離。

反應條件：在生理緩沖液（如PBS）中進行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。

陰性對照：設置不含目標蛋白的對照組，排除標簽非特異性結合的干擾。