人肽基精氨酸脫亞氨酶Ⅰ(PADI1)重組蛋白用于蛋白精氨酸瓜氨酸化修飾體外酶活測(cè)定、上皮角質(zhì)形成、皮膚屏障調(diào)控表觀修飾研究實(shí)驗(yàn)。
型號(hào):YS-DB2367
產(chǎn)品名稱:人肽基精氨酸脫亞氨酶Ⅰ(PADI1)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Peptidyl Arginine Deiminase Type I (PADI1)
PDI; PAD1; HPAD10; PDI1; Peptidylarginine Deiminase Type I; Protein-Arginine Deiminase Type-1; hPAD-Colony 10
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量:33.1kDa
實(shí)際分子量:33kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Pro298~Arg556 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):7.5
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理:

精氨酸瓜氨酸化酶活檢測(cè):PADI1 催化多肽精氨酸殘基脫亞胺生成瓜氨酸,瓜氨酸特異性抗體定量修飾產(chǎn)物,測(cè)定酶活性。
亞型特異性免疫定量:PADI1 專屬抗體不交叉識(shí)別 PADI2/3/4/6,ELISA 顯色定量重組蛋白含量。
免疫電泳純度鑒定:SDS-PAGE 轉(zhuǎn)膜雜交,特異性條帶驗(yàn)證蛋白表達(dá)完整性,分析雜蛋白污染。
鈣離子依賴性活性佐證:PADI 家族活性依賴鈣離子螯合激活,去除鈣離子后酶活喪失,反向確認(rèn)目標(biāo)蛋白酶信號(hào)。
公司正在出售的產(chǎn)品:

法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)重組蛋白 | Recombinant Human IFI30 | 鋅指/環(huán)指蛋白4封閉多肽 |
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白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶2(IRAK2)重組蛋白 | Recombinant Human CYPB | RAP2C蛋白封閉多肽 |
常見實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測(cè)細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時(shí)機(jī):細(xì)胞接種后24-48小時(shí),待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
陽性對(duì)照設(shè)置:在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對(duì):選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測(cè)抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實(shí)驗(yàn),優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對(duì)照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 人肽基精氨酸脫亞氨酶Ⅰ;PADI1;重組蛋白;
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