人糖原磷酸化酶B(PYGB)重組蛋白適用于糖原分解代謝酶活性檢測、肌肉能量供給、糖原貯積病相關體外代謝通路驗證實驗。
型號：YS-DB1415
產(chǎn)品名稱：人糖原磷酸化酶B(PYGB)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Glycogen Phosphorylase, Brain (PYGB)
GPBB
酶與激酶
代謝通路
肝膽病學
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位：：分泌
預測分子量：32.3kDa
實際分子量：33kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽：Pro477~Glu731 with N-terminal His Tag
緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點：9.1
應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：
糖原磷酸解酶活檢測：PYGB 催化糖原磷酸解生成葡萄糖 - 1 - 磷酸，定量產(chǎn)物生成速率測定磷酸化酶催化活性。
同工型特異性免疫定量：PYGB 腦型特異性抗體區(qū)分肝、肌肉型糖原磷酸化酶，ELISA 定量重組蛋白濃度。
免疫電泳純度質(zhì)控：SDS-PAGE 轉(zhuǎn)膜雜交，驗證分子量正確性，分析雜蛋白污染比例。
別構調(diào)節(jié)劑敏感性定性：AMP 激活、葡萄糖抑制 PYGB 活性，特征調(diào)控模式區(qū)分其他糖原代謝酶。
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蛋白復溶與保存：
1. 復溶前準備
實驗環(huán)境：在超凈工作臺內(nèi)進行操作，避免污染
試劑準備：無菌水、PBS緩沖液或產(chǎn)品說明書指定的復溶液
工具準備：無菌移液器、槍頭、離心管
2. 復溶步驟
短暫離心：將蛋白凍干粉管短暫離心（1000rpm，1min），使管壁和管蓋的蛋白粉末集中到管底
加入復溶液：按照說明書推薦的體積加入無菌水或指定復溶液，輕輕吹打混勻，避免渦旋振蕩防止蛋白變性
靜置溶解：室溫靜置5-10分鐘，期間可輕輕顛倒離心管幫助溶解，避免劇烈振蕩
分裝保存：根據(jù)實驗需要將復溶后的蛋白分裝成小份（如10μg/份），避免反復凍融
3. 保存條件
長期保存：-20℃或-80℃避光保存，加入50%甘油可提高穩(wěn)定性
短期保存：4℃可穩(wěn)定保存1-2周，需避免反復凍融
注意：
避免接觸強氧化劑、強酸強堿環(huán)境
若蛋白出現(xiàn)沉淀或渾濁，可4℃放置或短暫離心后取上清使用
關鍵字： 人糖原磷酸化酶B;PYGB;重組蛋白;
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