商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 人抗凝血酶(AT)真核蛋白 | 型號(hào) | YS-DB3045 |
物種 | Homo sapiens (Human，人) | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
型號(hào)：YS-DB3045
產(chǎn)品名稱：人抗凝血酶(AT)真核蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Eukaryotic Antithrombin (AT)
AT3; ATIII; SERPINC1; Anti-Thrombin Antibodies; Serpin Peptidase Inhibitor Clade C Member 1; Coding Sequence Signal Peptide Antithrombin Part 1
酶與激酶
代謝通路
血液病學(xué)
物種：Homo sapiens (Human，人)
來源：真核表達(dá)
宿主293F Cell
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位：：分泌
預(yù)測(cè)分子量：50.7kDa
實(shí)際分子量：60-70kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點(diǎn)：6.1
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
核心參數(shù)：
用于凝血抗凝通路體外研究、凝血抑制功能驗(yàn)證、血栓相關(guān)機(jī)制探究及凝血檢測(cè)試劑盒配套原料。
一、基礎(chǔ)核心參數(shù)
肝臟合成分泌型真核糖蛋白，分子量～58 kDa；肝素可大幅加速其抑制活性；靶向抑制凝血 IIa、Xa、IXa 等凝血因子。
體內(nèi)主要生理性抗凝核心蛋白。
二、核心生物功能
生理性抑制凝血瀑布，預(yù)防血栓形成
構(gòu)象捕獲凝血絲氨酸蛋白酶，不可逆滅活凝血酶、FXa 等關(guān)鍵分子，平衡凝血 - 抗凝系統(tǒng)，防止血管內(nèi)異常血栓自發(fā)生成，維持血液流動(dòng)性。
遺傳性缺乏易誘發(fā)易栓癥
AT 基因突變或血漿濃度不足，抗凝能力下降，患者靜脈血栓、肺栓塞復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)顯著升高
使用方法：
1. 蛋白復(fù)溶
解凍：從低溫冰箱取出蛋白后，立即置于冰上緩慢解凍，避免室溫放置導(dǎo)致蛋白變性。
緩沖液選擇：根據(jù)蛋白特性選擇合適的復(fù)溶緩沖液，常用基礎(chǔ)緩沖液為10-50mM Tris-HCl（pH7.0-8.0）或PBS（pH7.2-7.4）；部分蛋白需添加100-300mM NaCl維持滲透壓，或添加1-5mM DTT、β-巰基乙醇等還原劑保持蛋白穩(wěn)定性。
復(fù)溶操作：根據(jù)蛋白濃度，加入適量緩沖液使終濃度達(dá)到0.1-1.0mg/mL（部分難溶蛋白可適當(dāng)調(diào)整濃度）；輕輕顛倒離心管或用移液器緩慢吹打混勻，避免劇烈震蕩；置于冰上靜置10-30分鐘，期間可輕柔混勻2-3次，確保蛋白充分溶解。
2. 活性測(cè)定（以酶類蛋白為例）
試劑準(zhǔn)備：根據(jù)酶的催化特性，配制相應(yīng)的底物溶液、輔助因子溶液、反應(yīng)緩沖液等；確保所有試劑均為分析純以上級(jí)別，且在有效期內(nèi)。
反應(yīng)體系優(yōu)化：通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定酶的最適反應(yīng)溫度、pH值、底物濃度、酶濃度等參數(shù)；通常反應(yīng)體系體積為50-200μL，酶濃度需根據(jù)活性高低調(diào)整。
檢測(cè)操作：按照優(yōu)化后的反應(yīng)體系依次加入試劑，啟動(dòng)反應(yīng)后，通過分光光度法、熒光法、比色法等檢測(cè)方法，實(shí)時(shí)或終點(diǎn)檢測(cè)底物消耗、產(chǎn)物生成的信號(hào)變化。
活性計(jì)算：根據(jù)檢測(cè)到的信號(hào)變化值，結(jié)合摩爾消光系數(shù)、熒光量子產(chǎn)率等參數(shù)，計(jì)算酶的活性單位（U）；1U定義為在特定條件下，每分鐘催化1μmol底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的酶量。
3. Western Blot檢測(cè)
樣品處理：取適量復(fù)溶后的蛋白溶液，加入等體積的2×SDS上樣緩沖液，沸水浴加熱5-10分鐘使蛋白變性；若蛋白含二硫鍵，可添加β-巰基乙醇或DTT輔助變性。
電泳分離：將變性后的樣品加入SDS-PAGE凝膠的上樣孔，同時(shí)加入蛋白Marker；先以80V電壓運(yùn)行濃縮膠（約30分鐘），待樣品進(jìn)入分離膠后，調(diào)整電壓至120V繼續(xù)電泳（約60-90分鐘），直至蛋白Marker分離清晰。
轉(zhuǎn)膜操作：根據(jù)蛋白分子量選擇合適孔徑的PVDF或NC膜；采用濕轉(zhuǎn)或半干轉(zhuǎn)法將凝膠中的蛋白轉(zhuǎn)移至膜上，濕轉(zhuǎn)條件通常為200-300mA電流，轉(zhuǎn)膜時(shí)間60-120分鐘；轉(zhuǎn)膜后可通過麗春紅染色確認(rèn)轉(zhuǎn)膜效果。
封閉與孵育：用5%脫脂牛奶或BSA溶液封閉膜1-2小時(shí)，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)；加入一抗（按說明書推薦比例稀釋），4℃孵育過夜；次日用TBST緩沖液洗膜3次，每次10分鐘；加入HRP標(biāo)記的二抗（按說明書推薦比例稀釋），室溫孵育1小時(shí)；再次用TBST緩沖液洗膜3次，每次10分鐘。
顯色檢測(cè)：將膜浸入ECL化學(xué)發(fā)光試劑中，避光孵育1-5分鐘；使用化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)曝光檢測(cè)蛋白條帶，根據(jù)條帶位置和灰度分析蛋白表達(dá)情況。
公司正在出售的產(chǎn)品：
羧肽酶N1(CPN1)重組蛋白 | Recombinant Human PIH1D2 | NADH氧化還原酶輔酶10封閉多肽 |
羧肽酶N2(CPN2)重組蛋白 | Recombinant Mouse SLAMF3 | 白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18封閉多肽 |
羧肽酶Z(CPZ)重組蛋白 | Recombinant Human AB42 Precursor | HOXB4封閉多肽 |
肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)重組蛋白 | Recombinant Mouse CXCL14 | 免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域受體1封閉多肽 |
谷胱甘肽過氧化酶2(GPX2)重組蛋白 | Recombinant Human AB42 Precursor | 磷酸化真核啟動(dòng)因子2α封閉多肽 |
鈣蛋白酶10(CAPN10)重組蛋白 | Recombinant Human PLEKHB2 | 磷酸化組蛋白H3封閉多肽 |
組織蛋白酶B(CTSB)重組蛋白 | 人抗凝血酶(AT)真核蛋白Recombinant Human PI4KB | 乳腺癌雌激素調(diào)控蛋白GREB1封閉多肽 |
組織蛋白酶Z(CTSZ)重組蛋白 | Recombinant Human PDCD1 | 細(xì)胞色素B561結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 |
谷氨酸脫羧酶1(GAD1)重組蛋白 | Recombinant Human CTGF | NDST2蛋白封閉多肽 |
關(guān)鍵字： 人抗凝血酶;AT;真核蛋白;
上海研生實(shí)業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生"品牌。
我們努力將歐美進(jìn)口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視國內(nèi)科研市場(chǎng)的產(chǎn)品開發(fā)，推出了一系列具有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)。
同時(shí)國家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視，更多地側(cè)重于科研的投入。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得認(rèn)可。也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想，更有責(zé)任感，是您科研道路上值得信賴的伙伴。
公司的理念是：以誠信為本，努力打造優(yōu)質(zhì)品牌，為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務(wù)。