小鼠磷脂酰絲氨酸脫羧酶(PISD)重組蛋白用于線粒體磷脂合成代謝、膜重塑、細(xì)胞存活及凋亡相關(guān)酶活測(cè)定實(shí)驗(yàn)。
型號(hào):YS-DB2832
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠磷脂酰絲氨酸脫羧酶(PISD)重組蛋白
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱(chēng):Recombinant Phosphatidylserine Decarboxylase (PISD)
PSDC; PSD; PSSC; Phosphatidylserine decarboxylase proenzyme
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::線粒體
預(yù)測(cè)分子量:49.6kDa
實(shí)際分子量:50kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Met1~Leu406 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):9.6
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理:

磷脂酰絲氨酸脫羧產(chǎn)物色譜檢測(cè):PISD 催化磷脂酰絲氨酸脫羧生成磷脂乙醇胺,薄層色譜 / 液相分離脂質(zhì)產(chǎn)物,定量酶催化活性。
WB 特異性免疫鑒定:PISD 特異性抗體結(jié)合重組蛋白,條帶分子量匹配理論值。
放射性脂質(zhì)底物示蹤定量:同位素標(biāo)記磷脂酰絲氨酸底物,產(chǎn)物放射強(qiáng)度定量脫羧反應(yīng)轉(zhuǎn)化率。
SDS-PAGE 灰度純度質(zhì)控:灰度分析蛋白純度,評(píng)估雜蛋白、蛋白降解、聚集雜質(zhì)。
公司正在出售的產(chǎn)品:

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常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景操作指南:

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測(cè)細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時(shí)機(jī):細(xì)胞接種后24-48小時(shí),待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
陽(yáng)性對(duì)照設(shè)置:在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對(duì):選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測(cè)抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實(shí)驗(yàn),優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對(duì)照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字: 小鼠磷脂酰絲氨酸脫羧酶;PISD;重組蛋白;
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