商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 人蛋白激酶R(PKR)活性蛋白 | 型號 | YS-DB3109 |
物種 | Homo sapiens (Human，人) | 用途 | 僅供科研實驗 |
型號：YS-DB3109
產(chǎn)品名稱：人蛋白激酶R(PKR)活性蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Active Protein Kinase R (PKR)
PRKR; PRK-R; EIF2AK2; EIF2AK1; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 Alpha Kinase 2; Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase; P1/eIF-2A kinase
酶與激酶
細胞凋亡
感染免疫
物種：Homo sapiens (Human，人)
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 80%
等電點：8.9
應用：Cellculture;ActivityAssays.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
核心參數(shù)：
體外雙鏈 RNA 依賴激酶活性測定，用于抗病毒免疫、細胞應激凋亡及 PKR 調(diào)節(jié)劑篩選研究。
基礎核心參數(shù)
物種：人；基因：EIF2AK2；絲蘇氨酸激酶；胞質(zhì)潛伏型；表達：HEK293
核心生物功能
雙鏈 RNA 激活后磷酸化 eIF2α，全局抑制細胞翻譯起始，阻斷病毒蛋白復制，抗病毒防御
調(diào)控細胞應激、凋亡、炎癥應答，參與腫瘤、神經(jīng)退行性疾病病理調(diào)控
使用方法：
1. 蛋白復溶
解凍：從低溫冰箱取出蛋白后，立即置于冰上緩慢解凍，避免室溫放置導致蛋白變性。
緩沖液選擇：根據(jù)蛋白特性選擇合適的復溶緩沖液，常用基礎緩沖液為10-50mM Tris-HCl（pH7.0-8.0）或PBS（pH7.2-7.4）；部分蛋白需添加100-300mM NaCl維持滲透壓，或添加1-5mM DTT、β-巰基乙醇等還原劑保持蛋白穩(wěn)定性。
復溶操作：根據(jù)蛋白濃度，加入適量緩沖液使終濃度達到0.1-1.0mg/mL（部分難溶蛋白可適當調(diào)整濃度）；輕輕顛倒離心管或用移液器緩慢吹打混勻，避免劇烈震蕩；置于冰上靜置10-30分鐘，期間可輕柔混勻2-3次，確保蛋白充分溶解。
2. 活性測定（以酶類蛋白為例）
試劑準備：根據(jù)酶的催化特性，配制相應的底物溶液、輔助因子溶液、反應緩沖液等；確保所有試劑均為分析純以上級別，且在有效期內(nèi)。
反應體系優(yōu)化：通過預實驗確定酶的最適反應溫度、pH值、底物濃度、酶濃度等參數(shù)；通常反應體系體積為50-200μL，酶濃度需根據(jù)活性高低調(diào)整。
檢測操作：按照優(yōu)化后的反應體系依次加入試劑，啟動反應后，通過分光光度法、熒光法、比色法等檢測方法，實時或終點檢測底物消耗、產(chǎn)物生成的信號變化。
活性計算：根據(jù)檢測到的信號變化值，結合摩爾消光系數(shù)、熒光量子產(chǎn)率等參數(shù)，計算酶的活性單位（U）；1U定義為在特定條件下，每分鐘催化1μmol底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物的酶量。
3. Western Blot檢測
樣品處理：取適量復溶后的蛋白溶液，加入等體積的2×SDS上樣緩沖液，沸水浴加熱5-10分鐘使蛋白變性；若蛋白含二硫鍵，可添加β-巰基乙醇或DTT輔助變性。
電泳分離：將變性后的樣品加入SDS-PAGE凝膠的上樣孔，同時加入蛋白Marker；先以80V電壓運行濃縮膠（約30分鐘），待樣品進入分離膠后，調(diào)整電壓至120V繼續(xù)電泳（約60-90分鐘），直至蛋白Marker分離清晰。
轉(zhuǎn)膜操作：根據(jù)蛋白分子量選擇合適孔徑的PVDF或NC膜；采用濕轉(zhuǎn)或半干轉(zhuǎn)法將凝膠中的蛋白轉(zhuǎn)移至膜上，濕轉(zhuǎn)條件通常為200-300mA電流，轉(zhuǎn)膜時間60-120分鐘；轉(zhuǎn)膜后可通過麗春紅染色確認轉(zhuǎn)膜效果。
封閉與孵育：用5%脫脂牛奶或BSA溶液封閉膜1-2小時，封閉非特異性結合位點；加入一抗（按說明書推薦比例稀釋），4℃孵育過夜；次日用TBST緩沖液洗膜3次，每次10分鐘；加入HRP標記的二抗（按說明書推薦比例稀釋），室溫孵育1小時；再次用TBST緩沖液洗膜3次，每次10分鐘。
顯色檢測：將膜浸入ECL化學發(fā)光試劑中，避光孵育1-5分鐘；使用化學發(fā)光成像系統(tǒng)曝光檢測蛋白條帶，根據(jù)條帶位置和灰度分析蛋白表達情況。
公司正在出售的產(chǎn)品：
過氧化還原酶6(PRDX6)重組蛋白 | Recombinant Mouse Mesd | TRABD2A封閉多肽 |
跨膜絲氨酸蛋白酶6(TMPRSS6)重組蛋白 | Recombinant Rat Ccl3 | FAM154A蛋白封閉多肽 |
S-期激酶關聯(lián)蛋白1(SKP1)重組蛋白 | Recombinant Human ENG | 溶質(zhì)載體家族蛋白21成員1C1封閉多肽 |
核苷酸還原酶M1(RRM1)重組蛋白 | Recombinant Mouse CD7 | 磷酸化Src原癌基因封閉多肽 |
蛋白酶體亞基α5(PSMa5)重組蛋白 | Recombinant Human ENG | UL16結合蛋白2封閉多肽 |
小泛素相關修飾蛋白1(SUMO1)重組蛋白 | Recombinant Human GOLGB1 | 撲草凈OVA偶聯(lián)物 |
酮戊二酸脫氫酶(OGDH)重組蛋白 | 人蛋白激酶R(PKR)活性蛋白Recombinant Human GDF2 | 細胞色素P450 2C8封閉多肽 |
N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)重組蛋白 | Recombinant Human IGHA1 | 富含亮氨酸重復蛋白Q4封閉多肽 |
甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)重組蛋白 | Recombinant Mouse SIRPA | 腫瘤易感性候選基因5封閉多肽 |
關鍵字： 人蛋白激酶R;PKR;活性蛋白;
上海研生實業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學實驗產(chǎn)品，包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、等多個研究及應用領域。旗下有“上研生"品牌。
我們努力將歐美進口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視國內(nèi)科研市場的產(chǎn)品開發(fā)，推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務。
同時國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視，更多地側重于科研的投入。公司的服務和業(yè)務在同行獲得認可。也具備豐富的管理經(jīng)驗，同時我們建立了集技術支持、售后服務等多方位的服務體系。我們有激情、有理想，更有責任感，是您科研道路上值得信賴的伙伴。
公司的理念是：以誠信為本，努力打造優(yōu)質(zhì)品牌，為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務。