本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測原理，將高親和力的抗大鼠IL-3抗體包被于96孔酶標(biāo)板微孔中，作為固相捕獲載體，加入待測樣本和梯度標(biāo)準(zhǔn)品后，其中的IL-3抗原被特異性捕獲，洗板去除非特異性結(jié)合成分，再加入HRP酶標(biāo)檢測抗體形成夾心復(fù)合物，經(jīng)TMB底物顯色、終止液終止反應(yīng)后，檢測各孔吸光度，吸光度數(shù)值與IL-3抗原濃度呈線性正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計算出大鼠樣本中IL-3的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒
英文名稱：IL-3 ELISA Kit
貨號：Y-E1493
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤1.0pg/mL
檢測范圍：2.5pg/mL - 850pg/mL
反應(yīng)時間：整體實驗時長3.7小時
保存條件：2-8℃避光保存，標(biāo)準(zhǔn)品單獨密封存放
有效期：原裝試劑盒6個月，分裝標(biāo)準(zhǔn)品1個月有效
顯色系統(tǒng)：高靈敏TMB顯色體系，低背景、高辨識度
檢測波長：450nm主波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：濃度梯度對應(yīng)OD值擬合曲線，R2＞0.995
特異性：特異性識別大鼠IL-3，與其他造血相關(guān)細胞因子無明顯交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7.2%，板間CV≤9.2%
注意事項：避免樣本反復(fù)凍融，會導(dǎo)致蛋白降解；孵育溫度偏差不超過±1℃；終止后盡快上機讀數(shù)
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
IL-3 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶梯度稀釋，試劑盒室溫平衡 26min，排布酶標(biāo)板孔位；
標(biāo)準(zhǔn)孔、待測孔分別加入 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品、大鼠體液樣本，空白孔填充稀釋液；
所有微孔加入 100μL 酶標(biāo)抗 IL-3 抗體，覆膜密封板面；
37℃恒溫孵育 58min，一步完成抗原抗體結(jié)合；
洗板液浸泡微孔 40s，吸干，循環(huán)洗滌 5 次；
避光加入顯色底物混合液 100μL，37℃避光顯色 15min；
終止液混勻微孔，450nm 測吸光度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 IL-3 含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠白介素3;IL-3;ELISA試劑盒;
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