基于競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫分析法，板底預(yù)包被 17-OHP 重組抗原，樣本內(nèi)大鼠 17 羥孕酮與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗 17-OHP 抗體，洗滌除去游離組分后底物顯色，吸光值隨樣本 17-OHP 濃度升高而降低，利用梯度標(biāo)準(zhǔn)品曲線(xiàn)實(shí)現(xiàn)激素精準(zhǔn)定量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.3ng/mL，可檢出極低濃度血清17-OHP指標(biāo)

檢測(cè)范圍：0.6ng/mL - 60ng/mL

反應(yīng)時(shí)間：整體反應(yīng)85分鐘，樣本孵育55分鐘，二抗孵育30分鐘

保存條件：試劑盒所有組分2-8℃避光保存，開(kāi)蓋后試劑封口保存，防止揮發(fā)污染

有效期：未開(kāi)封有效期6個(gè)月，開(kāi)封后建議1個(gè)月內(nèi)用完

顯色系統(tǒng)：高穩(wěn)定性TMB顯色底物，顯色速率均勻，終止后顏色穩(wěn)定持久

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm單一主波長(zhǎng)檢測(cè)

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：6梯度標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)膮?shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，線(xiàn)性相關(guān)系數(shù)R2≥0.996

特異性：專(zhuān)一識(shí)別大鼠17羥孕酮，與其他孕激素、類(lèi)固醇激素?zé)o交叉結(jié)合反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤5%，板間變異系數(shù)≤7%

注意事項(xiàng)：避免使用溶血、黃疸血清樣本；試劑平衡室溫后混勻使用，無(wú)沉淀方可上機(jī)；顯色終止后立即讀數(shù)，防止數(shù)值漂移
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：

本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。

全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見(jiàn)光易失效。

移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。

孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。

洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。

終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。

終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。

實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。

不同批次試劑盒組分不可混用。

試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑平衡：試劑盒置于室溫平衡 20min，濃縮洗滌液稀釋 20 倍備用，凍存樣本提前冰上融化平衡。

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?zhuān)?/span>17-OHP 標(biāo)準(zhǔn)品干粉溶解后，倍比稀釋 6 個(gè)梯度濃度，單獨(dú)設(shè)置空白調(diào)零孔。

加樣孵育：每孔加入 50μL 標(biāo)準(zhǔn)品 / 待測(cè)樣本，再添加 50μL 酶標(biāo)記抗體，密封封板膜，37℃避光孵育 55min。

洗板操作：排空孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡每孔 30s，拍干孔底殘留液體，重復(fù)洗板 5 次。

底物顯色：每孔加顯色液 A、B 各 50μL，避光 37℃反應(yīng) 12min，觀察藍(lán)色深淺區(qū)分濃度梯度。

終止讀數(shù)：添加終止液終止酶促反應(yīng)，混勻后 8min 內(nèi)檢測(cè) 450nm OD 數(shù)值。

數(shù)據(jù)計(jì)算：繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，將樣本吸光度代入公式，計(jì)算樣本中 17 - 羥孕酮表達(dá)水平。