競爭酶聯(lián)免疫檢測原理，微孔板包被 25 (OH) D3 特異性抗原，樣本中大鼠 25 羥基維生素 D3 與固相抗原競爭結合酶標記抗 VD3 抗體，洗板去除未結合物后顯色檢測 OD 值，依據(jù)標準曲線定量血清、組織勻漿中 25 (OH) D3 含量。
產品參數(shù)：
產品名稱 | 大鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1412 |
英文名稱 | HVD3 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度0.2ng/mL，精準檢測大鼠血清維生素D3代謝產物
檢測范圍：0.5ng/mL - 50ng/mL
反應時間：總時長90分鐘，樣本孵育60分鐘，酶結合物孵育30分鐘
保存條件：所有試劑2-8℃避光保存，嚴禁冷凍，標準品開封后分裝凍存
有效期：未開封有效期6個月，分裝標準品-20℃可保存3個月
顯色系統(tǒng)：高靈敏度TMB顯色體系，顯色信號強、背景低
檢測波長：450nm主波長檢測
標準曲線繪制：6梯度稀釋標準品，四參數(shù)Logistic擬合，R2≥0.997
特異性：特異性識別25羥基維生素D3，與維生素D2、維生素D無交叉反應
重復性：板內CV≤4.5%，板間CV≤6.5%
注意事項：樣本采集后避光保存，避免維生素D降解；加樣精準，避免氣泡產生；終止后10分鐘內完成檢測，保證數(shù)據(jù)準確
試劑盒組成：
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物，提供酶結合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結合物質
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
試劑平衡：試劑盒室溫靜置 25min，濃縮洗滌液 1:20 稀釋，冷藏樣本室溫解凍混勻。
標準品稀釋：25 (OH) D3 標準品復溶后梯度稀釋 6 組濃度，設置空白調零孔。
加樣孵育：每孔 50μL 標準品 / 樣本，添加 HRP 酶標記抗體 50μL，密封 37℃避光孵育 60min。
洗板操作：棄去液體，洗滌液浸泡 30s，拍干孔內殘液，重復洗板 5 次。
底物顯色：每孔加顯色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃孵育 16min。
終止讀數(shù)：終止液 50μL 混勻，10min 內酶標儀檢測 450nm OD 值。
數(shù)據(jù)計算：標準曲線計算樣本 25 羥基維生素 D3 濃度，評估大鼠維生素 D 水平。
關鍵字： 大鼠25羥基維生素D3;OH)D3/25 HVD3;ELISA試劑盒;
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