本試劑盒采用間接ELISA檢測原理，酶標板微孔包被鉤端螺旋體特異性抗原，待測大鼠樣本中的Lep IgG抗體可與固相抗原特異性結(jié)合，洗板后加入酶標記抗大鼠IgG二抗，催化底物顯色，樣本中Lep IgG抗體含量越高，顯色吸光度值越高，通過標準曲線可定量檢測大鼠體內(nèi)鉤端螺旋體IgG抗體水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1120 |
英文名稱 | Lep IgG ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測滴度1:10
檢測范圍：1:10 - 1:1280樣本稀釋度
反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長180分鐘（樣本結(jié)合90分鐘、二抗溫育60分鐘、顯色30分鐘）
保存條件：2-8℃避光保存，酶結(jié)合物嚴禁冷凍，洗滌液室溫保存
有效期：未開封有效期12個月，開封后2個月內(nèi)使用
顯色系統(tǒng)：TMB底物顯色，酸性終止液終止顯色
檢測波長：450nm
標準曲線繪制：采用陽性對照梯度稀釋擬合曲線，判定樣本抗體陽性/陰性及滴度
特異性：特異性結(jié)合大鼠鉤端螺旋體IgG抗體，與其他病原體抗體無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7%，板間CV≤9%
注意事項：樣本需無菌分離血清，無細菌污染；溫育過程保持濕度飽和，避免孔板干燥；結(jié)果判定統(tǒng)一時間讀數(shù)
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程：
試劑盒室溫平衡 35min，梯度稀釋鉤端螺旋體 IgG 陽性標準品，設(shè)置陰性對照孔、標準孔、大鼠血清檢測孔。
直接加樣入孔：標準品孔加梯度標準液 100μL，待測孔加大鼠血清稀釋樣本 100μL，空白孔加稀釋液。
封板膜密封，37℃溫育 90min，使樣本內(nèi) Lep IgG 與固相抗原結(jié)合。
傾倒廢液，洗滌液加滿每孔靜置 38s，洗板重復(fù) 6 次，徹底洗脫非特異性結(jié)合物質(zhì)。
除空白孔外加入羊抗大鼠 IgG 酶標二抗 100μL，避光封板 37℃孵育 40min。
每孔加入 TMB 顯色液 100μL，避光輕搖，37℃顯色 20min。
加入終止液終止反應(yīng)，450nm 測 OD 值，對照標準曲線判定樣本鉤端螺旋體 IgG 滴度。
關(guān)鍵字： 大鼠鉤端螺旋體IgG;Lep IgG;ELISA試劑盒;
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