本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理,酶標(biāo)板包被純化的大鼠BMP-7特異性抗體,待測(cè)樣本中的BMP-7抗原與包被抗體特異性結(jié)合,后續(xù)結(jié)合酶標(biāo)記二抗并催化底物顯色,終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線,定量測(cè)定大鼠樣本中骨成型蛋白7的表達(dá)含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1404 |
英文名稱 | BMP-7 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測(cè)濃度≤12pg/mL
檢測(cè)范圍:25pg/mL - 1000pg/mL
反應(yīng)時(shí)間:總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)160分鐘(樣本溫育100分鐘、酶溫育30分鐘、顯色30分鐘)
保存條件:2-8℃避光冷藏,標(biāo)準(zhǔn)品單獨(dú)分裝-20℃保存
有效期:未開(kāi)封有效期6個(gè)月,開(kāi)封后1個(gè)月內(nèi)用完
顯色系統(tǒng):高穩(wěn)定TMB顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm/570nm雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,R2≥0.990
特異性:專一識(shí)別大鼠BMP-7,與BMP-2、BMP-4無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤8%,板間CV≤10%
注意事項(xiàng):檢測(cè)前試劑充分混勻,無(wú)沉淀;上機(jī)檢測(cè)前去除孔板表面水珠
儲(chǔ)存與有效期:
未開(kāi)封整套試劑盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷凍;有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條:自封袋密封,內(nèi)置干燥劑 2~8℃避光;1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
濃縮洗滌液:2~30℃常溫保存,結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品:分裝 - 20℃凍存,避免反復(fù)凍融,1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
試劑室溫放置 34min,溶解凍干 BMP-7 標(biāo)準(zhǔn)品做梯度稀釋,對(duì)酶標(biāo)板孔位分類標(biāo)記。
一步法直接加樣 100μL 梯度標(biāo)準(zhǔn)品與大鼠骨提取液樣本至對(duì)應(yīng)孔,空白孔補(bǔ)稀釋液。
密封酶標(biāo)板,37℃恒溫孵育 78min,固相載體捕獲樣本中 BMP-7 抗原。
倒掉孔內(nèi)液體,洗滌液浸泡每孔 39s,重復(fù)洗板 5 次,徹底清除游離蛋白。
所有樣品孔加入酶聯(lián)二抗工作液 100μL,避光封板 37℃孵育 31min。
分加顯色 A 液、B 液各 50μL,震蕩混勻,37℃避光顯色 18min。
加入終止液終止顯色,酶標(biāo)儀 450nm 讀取吸光度,計(jì)算樣本 BMP-7 表達(dá)量。
關(guān)鍵字: 大鼠骨成型蛋白7;BMP-7;ELISA試劑盒;
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