本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，預(yù)先將大鼠中性粒/中心體特異性抗原包被于酶標板，封閉非特異性位點后加入待測樣本，樣本中的ACA抗體可與固相抗原特異性免疫結(jié)合，洗滌后加入HRP標記二抗孵育結(jié)合，底物顯色終止后測定吸光度，吸光度值與樣本ACA抗體含量正相關(guān)，通過標準曲線可定量檢測目標抗體濃度。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒

英文名稱：ACA ELISA Kit
貨號：Y-E1628

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.12ng/mL

檢測范圍：0.24ng/mL - 15ng/mL

反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長135分鐘

保存條件：2-8℃避光冷藏，防潮密封保存

有效期：未開封有效期8個月

顯色系統(tǒng)：單組分TMB顯色液，操作便捷

檢測波長：450nm檢測波長

標準曲線繪制：四參數(shù)Logistic擬合標準曲線

特異性：特異性識別大鼠抗中性粒、中心體抗體，與其他細胞抗體無交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8.3%，板間CV≤9.7%

注意事項：樣本離心徹底，無細胞沉淀；洗滌步驟充分，降低本底值
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫回溫 27min，稀釋洗滌緩沖液，調(diào)配酶應(yīng)用液。

分組標記酶標板微孔，空白孔只加稀釋液，標準品、對照、待測稀釋樣本與酶試劑同步加孔。

封板 37℃孵育 64min。

洗板 6 次，浸泡 31s / 次，徹底吸干板內(nèi)殘留洗液。

顯色底物避光反應(yīng) 13min。

終止液混勻終止體系反應(yīng)。

450nm 酶標儀測值，計算 ACA 抗體含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：