本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù),固相包被大鼠PPAR-γ特異性抗體,待測大鼠樣本中的PPAR-γ抗原與抗體特異性結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,底物顯色后檢測吸光度,數(shù)值與抗原濃度正相關(guān),可精準定量樣本中PPAR-γ含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1255 |
英文名稱 | PPAR-γ ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度≤9pg/mL
檢測范圍:18pg/mL - 700pg/mL
反應(yīng)時間:總反應(yīng)時長150分鐘(樣本溫育90分鐘、酶溫育30分鐘、顯色30分鐘)
保存條件:2-8℃避光冷藏,標準品-20℃分裝凍存
有效期:未開封有效期8個月,開封后1個月內(nèi)用完
顯色系統(tǒng):TMB顯色體系,顯色穩(wěn)定、背景低
檢測波長:450nm/570nm雙波長校正
標準曲線繪制:四參數(shù)擬合標準曲線,R2≥0.992
特異性:特異性識別大鼠PPAR-γ,與PPAR-α無交叉識別反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤7%,板間CV≤9%
注意事項:樣本避免高溫、反復(fù)凍融;加樣均勻,避免孔間誤差
關(guān)鍵注意事項:
實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程:
試劑盒組分室溫平衡 29min,倍比稀釋 PPAR-γ 凍干標準品,區(qū)分酶標板標準、待測、空白孔。
直接向各孔添加標準品、大鼠脂肪組織提取樣本 100μL,空白孔加入樣本稀釋緩沖液。
封板膜封口,37℃孵育 67min,完成抗原抗體固相結(jié)合。
倒掉孔內(nèi)液體,洗滌液注滿每孔靜置 28s,洗板 4 次,吸水紙拍干余液。
除去空白孔,加入酶標記二抗工作液 100μL,避光 37℃孵育 26min。
加入 TMB 顯色液 100μL,避光輕微振蕩,顯色 12min。
終止液終止顯色,450nm 測定 OD 值,對照標準曲線計算 PPAR-γ 表達量。
關(guān)鍵字: 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ; PPAR-γ;ELISA試劑盒;
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