本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，酶標板包被大鼠RANKL特異性抗體，待測大鼠樣本中的RANKL抗原與固相抗體特異性結合，形成免疫復合物后結合酶標二抗，底物顯色終止后檢測吸光度，對照標準曲線定量檢測樣本中RANKL的含量。
產品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度≤0.05ng/mL

檢測范圍：0.1ng/mL～5ng/mL

反應時間：總實驗時長100min，樣本孵育70min，顯色15min，終止讀數(shù)5min

保存條件：2～8℃干燥避光保存，試劑密封完好，禁止低溫冷凍

有效期：原裝未拆封6個月，開封后試劑建議2周內使用完畢

顯色系統(tǒng)：優(yōu)化型TMB顯色體系，底物穩(wěn)定，顯色梯度均勻

檢測波長：450nm單波長檢測，可搭配620nm參比校準

標準曲線繪制：采用梯度標準品濃度梯度稀釋檢測，四參數(shù)回歸擬合曲線，R2≥0.992

特異性：僅特異性結合大鼠RANKL，對大鼠骨代謝相關同源蛋白無交叉識別，異種屬交叉反應極低

重復性：板內CV≤7%，板間CV≤9%

注意事項：骨組織、血清樣本需充分離心澄清，避免渾濁影響OD值；孵育過程嚴禁孔板干燥；終止液添加順序統(tǒng)一，避免誤差。
關鍵注意事項：

本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。

全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。

移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。

孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。

洗板必須充分，殘液會造成非特異性結合，背景偏高。

終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結果失真。

終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。

實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。

不同批次試劑盒組分不可混用。

試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。

公司正在出售的產品：

實驗操作流程：

試劑盒室溫平衡 33min，稀釋 RANKL 凍干標準品做梯度稀釋，標記酶標板標準梯度孔、大鼠骨細胞上清待測孔。

直接向對應孔加入標準品、稀釋待測樣本各 100μL，空白孔加入稀釋緩沖液。

封板封口，37℃恒溫孵育 72min，完成配體蛋白與固相抗體結合。

棄液洗板，洗滌液浸潤每孔 31s，循環(huán)洗板 5 次，充分洗脫未結合組分。

所有樣品孔加入酶標記特異性抗體 100μL，避光封板孵育 30min。

分加顯色 A、B 液各 50μL，輕微震蕩后避光顯色 15min。

滴加終止液終止酶促反應，酶標儀 450nm 讀取吸光度，計算 RANKL 含量。