本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法,酶標板固定大鼠ACV-A特異性抗體,樣本中的活化素A抗原與固相抗體特異性結合,結合酶標記檢測抗體后催化底物顯色,吸光度與ACV-A濃度正相關,通過標準曲線完成精準定量。
產品參數(shù):
產品名稱 | 大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1670 |
英文名稱 | ACV-A ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度≤0.06ng/mL
檢測范圍:0.12ng/mL~9ng/mL
反應時間:總時長105min,孵育75min,顯色20min,讀數(shù)5min
保存條件:2~8℃避光冷藏,密封完好,防止試劑揮發(fā)、失活
有效期:未開封6個月,開封后1個月內有效
顯色系統(tǒng):細胞因子專用TMB高靈敏顯色系統(tǒng)
檢測波長:450nm檢測波長
標準曲線繪制:梯度標準品擬合,四參數(shù)回歸,R2≥0.991
特異性:特異性識別大鼠活化素A,與活化素B、抑制素無交叉反應
重復性:板內CV≤7%,板間CV≤9%
注意事項:樣本避免高溫、反復凍融;孵育溫度恒定37℃;顯色避光,終止后立即讀數(shù)。
關鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
試劑盒組分室溫平衡 32min,梯度稀釋 ACV-A 標準品,標記酶標板標準孔、大鼠卵巢細胞上清待測孔。
直接加樣:標準孔加梯度標準液 100μL,待測孔加稀釋細胞上清 100μL,空白孔添加稀釋緩沖液。
覆膜封板,37℃孵育 77min,完成活化素 A 抗原與固相抗體結合。
傾倒孔內液體,洗滌液浸潤每孔 35s,循環(huán)洗板 5 次,徹底洗去未結合組分。
所有檢測孔加入酶標記檢測抗體 100μL,避光 37℃孵育 31min。
分加顯色 A、B 液各 50μL,輕柔震蕩混勻,避光顯色 16min。
滴加終止液終止顯色,酶標儀 450nm 讀取吸光度,計算 ACV-A 濃度。
關鍵字: 大鼠活化素A;ACV-A;ELISA試劑盒;
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