本試劑盒運用雙抗體夾心ELISA技術，酶標板包被大鼠MYO/MB特異性抗體，待測大鼠樣本中的肌紅蛋白抗原與包被抗體特異性結合，結合酶標記抗體后催化底物顯色，依據(jù)吸光度數(shù)值和標準曲線，精準定量肌紅蛋白含量。
產品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度≤0.1ng/mL

檢測范圍：0.2ng/mL～20ng/mL

反應時間：總時長95min，孵育65min，顯色15min，讀數(shù)5min

保存條件：2～8℃避光冷藏，試劑密封完好

有效期：未開封6個月，開封后1個月內用完

顯色系統(tǒng)：肌肉標志物專屬TMB顯色系統(tǒng)

檢測波長：450nm檢測波長

標準曲線繪制：梯度標準品擬合，四參數(shù)回歸，R2≥0.991

特異性：特異性檢測大鼠肌紅蛋白，與肌球蛋白、肌動蛋白無交叉反應

重復性：板內CV≤7.5%，板間CV≤9.5%

注意事項：肌肉損傷樣本需及時處理；無溶血樣本檢測效果最佳；實驗條件全程統(tǒng)一。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經遞質 / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產品：

實驗操作流程：

試劑盒室溫放置 28min，梯度稀釋肌紅蛋白標準品，排布酶標板空白對照、標準、大鼠血清樣本孔。

一步直接加樣 100μL 標準品與稀釋血清樣本入對應孔，空白孔加入等量樣本稀釋液。

覆膜封口，37℃孵育 64min，完成肌紅蛋白與包被抗體結合。

棄凈孔內液體，洗滌液加滿每孔靜置 26s，洗板 4 次，倒扣拍干余液。

非空白孔加入酶聯(lián)二抗工作液 100μL，避光封板孵育 23min。

加入顯色 AB 混合底物液 100μL，輕搖混勻，37℃避光顯色 11min。

終止液終止反應，450nm 測定 OD 值，對照標準曲線得出 MYO/MB 數(shù)值。