本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心ELISA原理,酶標(biāo)板微孔固定抗大鼠IgG特異性抗體,待測(cè)大鼠樣本中的IgG抗原與固相抗體結(jié)合,再加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的二抗形成免疫復(fù)合物,催化底物產(chǎn)生顯色反應(yīng),通過(guò)檢測(cè)吸光度、對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),定量檢測(cè)樣本中IgG的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):IgG ELISA Kit
貨號(hào):Y-E1446
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測(cè)濃度≤0.3μg/mL
檢測(cè)范圍:1μg/mL - 50μg/mL
反應(yīng)時(shí)間:總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)110min
保存條件:2-8℃避光保存,所有試劑禁止冷凍,開(kāi)封后密封保存
有效期:未開(kāi)封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng):經(jīng)典TMB顯色體系,顯色快速均勻
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm單波長(zhǎng)檢測(cè)
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制:梯度IgG標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)值,擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),計(jì)算樣本濃度
特異性:特異性識(shí)別大鼠IgG亞型,與其他免疫球蛋白無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV<8%,板間CV<10%
注意事項(xiàng):血清樣本離心徹底,無(wú)纖維蛋白殘留;試劑平衡至室溫后再使用;溫育溫度嚴(yán)格37℃
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū),不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

預(yù)包被板每孔上樣標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 47μL,大鼠外周血血清樣本 47μL,設(shè)置空白孔。
每孔加入 HRP 標(biāo)記抗體液 104μL,覆膜密封,37℃孵育 64min。
廢液排空,洗滌液注滿(mǎn)微孔靜置 23s,拍干,洗板 4 次。
避光滴加顯色 A、B 液各 50μL,輕微晃動(dòng),暗處顯色 15min。
加入終止液 50μL 終止反應(yīng),橫向晃動(dòng)微孔板混勻液體。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度,記錄所有孔位數(shù)據(jù)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算 IgG 濃度,樣本濃度超出范圍稀釋后復(fù)測(cè)。
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關(guān)鍵字: 大鼠免疫球蛋白G;IgG;ELISA試劑盒;
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