本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理,固相載體包被大鼠BGP/Gehrelin特異性捕獲抗體,待測(cè)大鼠樣本中的腦腸肽抗原與抗體特異性結(jié)合,洗去未結(jié)合雜質(zhì)后加入酶標(biāo)二抗形成免疫復(fù)合物,底物顯色深淺與抗原含量正相關(guān),通過(guò)吸光度檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)曲線換算,精準(zhǔn)定量樣本中BGP/Gehrelin濃度。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):BGP/Gehrelin ELISA Kit
貨號(hào):Y-E1408
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測(cè)濃度≤0.05ng/mL
檢測(cè)范圍:0.1ng/mL - 7ng/mL
反應(yīng)時(shí)間:總反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)135min
保存條件:2-8℃避光保存,多肽類(lèi)試劑密封存放,禁止冷凍
有效期:未開(kāi)封有效期6個(gè)月
顯色系統(tǒng):高靈敏度多肽專(zhuān)用TMB顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm、620nm雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:6梯度標(biāo)準(zhǔn)品擬合曲線,R2≥0.995,精準(zhǔn)定量
特異性:特異性結(jié)合大鼠BGP/Gehrelin,與其他胃腸肽、神經(jīng)肽無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV<7%,板間CV<9%
注意事項(xiàng):血漿樣本需添加抗凝劑,避免肽類(lèi)降解;樣本低溫凍存,避免反復(fù)凍融;溫育時(shí)間精準(zhǔn)把控
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū),不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

包被微孔板各孔添加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50μL,大鼠血漿樣本 50μL,空白孔添加緩沖液。
每孔加入酶標(biāo)工作液 100μL,封板膜密封,37℃孵育 62min。
洗板液加滿微孔靜置 24s,棄液拍干,重復(fù)洗滌 4 次。
避光依次加入顯色 A 液、B 液各 50μL,輕搖,避光顯色 16min。
每孔滴加終止液 50μL 終止顯色反應(yīng),混勻液體。
酶標(biāo)儀 450nm 讀取各孔 OD 數(shù)值,去除本底干擾。
標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算腦腸肽濃度,分析攝食相關(guān)激素表達(dá)量。
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關(guān)鍵字: 大鼠腦腸肽;BGP/Gehrelin;ELISA試劑盒;
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