本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，預(yù)先將大鼠BDNF特異性抗體包被于酶標(biāo)板，加入待測大鼠樣本及梯度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的BDNF抗原與固相抗體結(jié)合，加入酶標(biāo)記檢測抗體構(gòu)建免疫夾心結(jié)構(gòu)，底物顯色終止后，根據(jù)吸光度和標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)定量BDNF含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
英文名稱：BDNF ELISA Kit
貨號：Y-E1669
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測濃度≤0.08ng/mL
檢測范圍：0.2ng/mL - 10ng/mL
反應(yīng)時間：總反應(yīng)時長130min
保存條件：2-8℃避光密封保存，神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑禁止凍融
有效期：未開封有效期6個月
顯色系統(tǒng)：高靈敏度神經(jīng)因子專用TMB顯色體系
檢測波長：450nm波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6點梯度標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合，R2≥0.995
特異性：特異性識別大鼠BDNF，與NGF、GDNF等神經(jīng)營養(yǎng)因子無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV＜7.5%，板間CV＜9.5%
注意事項：腦、血清樣本低溫保存，避免蛋白降解；溫育均勻，保證免疫結(jié)合充分；讀數(shù)及時精準(zhǔn)
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
微孔板每孔加入梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品 52μL，腦組織提取待測樣本 52μL。
加入酶標(biāo)記二抗工作液 99μL，封板避光孵育，37℃反應(yīng) 63min。
棄凈孔內(nèi)液體，洗滌液浸泡 31s，拍干水分，連續(xù)洗板 5 次。
避光添加顯色 AB 液各 50μL，混勻后室溫避光顯色 17min。
每孔添加終止液 50μL 終止酶促反應(yīng)，搖晃微孔板混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 讀取吸光度原始數(shù)據(jù)。
依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 BDNF 含量，評估神經(jīng)營養(yǎng)因子表達。
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關(guān)鍵字： 大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子;BDNF;ELISA試劑盒;
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