本試劑盒運用雙抗體夾心酶免疫檢測原理,酶標(biāo)板預(yù)先包被大鼠CGRP特異性抗體,可特異性捕獲樣本中的降鈣素基因相關(guān)肽抗原。孵育完成特異性免疫結(jié)合后,洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì),加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測抗體,形成固相免疫復(fù)合物。底物顯色強度與CGRP含量成正比,通過檢測吸光度并對照標(biāo)準(zhǔn)曲線,可定量測定大鼠樣本中CGRP的表達水平。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1379 |
英文名稱 | CGRP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度≤0.5pg/mL
檢測范圍:1pg/mL - 120pg/mL
反應(yīng)時間:總反應(yīng)時長120min(孵育90min、顯色30min)
保存條件:2-8℃干燥避光冷藏,禁止冷凍試劑
有效期:未開封12個月
顯色系統(tǒng):優(yōu)化TMB顯色、酸性終止系統(tǒng)
檢測波長:450nm,630nm校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:梯度標(biāo)準(zhǔn)品OD值檢測,四參數(shù)Logistic擬合曲線
特異性:特異性識別大鼠CGRP,無神經(jīng)肽類交叉反應(yīng)
重復(fù)性:板內(nèi)CV≤7%,板間CV≤9%
注意事項:實驗全程無熱源污染,保證抗原抗體結(jié)合效率
關(guān)鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
試劑常溫放置 29min,稀釋濃縮洗滌液,梯度稀釋 CGRP 標(biāo)準(zhǔn)品,選取酶標(biāo)板條。
標(biāo)準(zhǔn)孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)品 50μL,待測樣本孔上樣 50μL 預(yù)處理樣本,空白孔補樣本稀釋液。
全孔加入酶結(jié)合液 100μL,密封酶標(biāo)板,37℃孵育 60min。
洗板 5 次,洗液浸泡 28s 每次,甩干液體拍干微孔。
避光添加顯色 A、B 底物各 50μL,37℃避光顯色 15min。
加入終止液 50μL 終止顯色,輕微震蕩。
450nm 測吸光值,曲線計算 CGRP 含量。
關(guān)鍵字: 大鼠降鈣素基因相關(guān)肽;CGRP;ELISA試劑盒;
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