本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理，固相載體包被大鼠CS特異性捕獲抗體，待測(cè)大鼠樣本中的CS抗原與抗體特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合雜質(zhì)后加入酶標(biāo)二抗形成免疫復(fù)合物，底物顯色深淺與CS含量呈正相關(guān)，通過(guò)吸光度檢測(cè)及標(biāo)準(zhǔn)曲線換算，精準(zhǔn)定量樣本中CS濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒
英文名稱：CS ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1060
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.09U/mL，可精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠線粒體、組織中檸檬酸合酶活性含量。
檢測(cè)范圍：0.1U/mL - 30U/mL，適配大鼠能量代謝、線粒體功能相關(guān)樣本檢測(cè)。
反應(yīng)時(shí)間：總實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)100分鐘，樣本孵育35min、酶孵育30min、顯色20min、終止讀數(shù)15min。
保存條件：2-8℃避光冷藏保存，酶試劑嚴(yán)禁冷凍，防止酶蛋白變性失活。
有效期：原裝試劑盒有效期6個(gè)月，恒溫保存性能穩(wěn)定。
顯色系統(tǒng)：特異性酶促TMB顯色體系，反應(yīng)專一，顯色梯度清晰，無(wú)背景干擾。
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm檢測(cè)波長(zhǎng)，600nm校正波長(zhǎng)，提升檢測(cè)準(zhǔn)確性。
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，R2≥0.991，滿足代謝酶精準(zhǔn)定量需求。
特異性：專一識(shí)別大鼠檸檬酸合酶(CS)，與三羧酸循環(huán)其他代謝酶無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好。
注意事項(xiàng)：組織樣本需低溫勻漿，全程冰上操作，防止CS酶活性降解；試劑使用前充分混勻。
儲(chǔ)存與有效期：
未開(kāi)封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開(kāi)封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
微孔板每孔加入梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品 55μL，線粒體裂解待測(cè)樣本 55μL，設(shè)立陰性對(duì)照。
全孔加入酶標(biāo)記抗體工作液 95μL，封板密封，37℃孵育 56min。
孔內(nèi)液體全部?jī)A倒，洗滌液浸泡 33s，拍干，連續(xù)洗板 4 次。
避光加入顯色 A、B 液各 50μL，混勻后室溫顯色 17min。
加入終止液 50μL 終止酶促顯色，晃動(dòng)微孔板混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度并記錄數(shù)據(jù)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算檸檬酸合酶濃度，反映三羧酸循環(huán)關(guān)鍵酶表達(dá)。
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關(guān)鍵字： 大鼠檸檬酸合酶;CS;ELISA試劑盒;
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