本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，酶標板固定抗大鼠CLU特異性抗體，加入標準品和待測大鼠樣本，樣本中CLU抗原與固相抗體特異性結合，后續(xù)結合酶標記檢測抗體形成夾心復合物，顯色反應后檢測吸光度，依據(jù)標準曲線測定大鼠樣本中CLU的含量。
基本參數(shù)?：

產品名稱：大鼠凝聚素(CLU)ELISA試劑盒

英文名稱：CLU ELISA Kit
貨號：Y-E1042

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測下限≤0.05ng/mL，可精準檢出大鼠血清、組織中微量凝聚素蛋白。

檢測范圍：0.08ng/mL - 20ng/mL，覆蓋大鼠炎癥、損傷修復模型CLU表達區(qū)間。

反應時間：全程實驗95分鐘，樣本孵育30min、酶孵育30min、顯色20min、終止15min。

保存條件：2-8℃避光冷藏，所有試劑密封存放，避免受潮、污染。

有效期：未開封試劑盒有效期6個月，規(guī)范存放無活性衰減。

顯色系統(tǒng)：優(yōu)化TMB顯色體系，顯色均勻穩(wěn)定，高低濃度區(qū)分度高。

檢測波長：450nm主檢測波長，630nm參比波長，校正系統(tǒng)誤差。

標準曲線繪制：四參數(shù)Logistic擬合曲線，R2≥0.992，定量精準。

特異性：特異性結合大鼠凝聚素(CLU)，與同源凋亡相關蛋白無交叉反應。

重復性：板內CV≤7%，板間CV≤9%，重復性優(yōu)異。

注意事項：樣本避免反復凍融，防止CLU蛋白降解；孵育過程保持濕度，防止孔內液體蒸發(fā)濃縮。
試劑盒組成：

預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結合目標物

標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)

生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物，提供酶結合位點

辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結合物質

封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：

預包被板每孔上樣標準品溶液 50μL，大鼠血清樣本 50μL，空白孔添加稀釋緩沖液。

酶結合工作液 100μL 加入各孔，封板膜封閉，37℃孵育 62min。

洗板液加滿微孔靜置 27s，棄液拍干，重復洗滌 5 次。

避光依次加入顯色 A 液、B 液各 50μL，輕搖板體，避光顯色 14min。

每孔加入終止液 50μL 終止反應，混勻孔內體系。

酶標儀 450nm 讀取 OD 讀數(shù)，剔除偏離過大數(shù)據(jù)。

換算凝聚素蛋白濃度，檢測應激相關蛋白表達水平。
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