本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，將純化的大鼠iNOS特異性抗體固定于酶標(biāo)板微孔，加入標(biāo)準(zhǔn)品及大鼠待測樣本后，樣本中的誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除游離成分，加入酶標(biāo)記iNOS檢測抗體形成夾心復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，吸光度數(shù)值與樣本中iNOS濃度成正比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合完成定量分析。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1341 |
英文名稱 | iNOS ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度0.1ng/mL
檢測范圍：0.25ng/mL - 30ng/mL
反應(yīng)時間：全程130分鐘（樣本孵育70min，酶標(biāo)孵育30min，顯色30min）
保存條件：2-8℃避光冷藏，標(biāo)準(zhǔn)品-20℃分裝凍存
有效期：未開封儲存有效期10個月
特異性：特異性識別大鼠iNOS，與eNOS、nNOS亞型無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤5%，板間變異系數(shù)CV≤8%
注意事項(xiàng)：樣本需低溫處理，防止酶失活；實(shí)驗(yàn)避免一氧化氮?dú)怏w干擾；孵育環(huán)境恒溫恒濕
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 30min，配制洗滌緩沖液，逐級稀釋 iNOS 標(biāo)準(zhǔn)品，標(biāo)記酶標(biāo)板檢測微孔組別。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入梯度誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，待測孔加入 50μL 大鼠組織裂解液，空白孔無液體添加。
全部檢測孔加入一步法酶偶聯(lián)抗體工作液 100μL，覆膜封板，37℃孵育 58min。
揭膜棄液，洗滌液加滿微孔浸泡 30s 甩干，洗板 4 次，拍干殘留洗滌液。
每孔加入顯色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 17min。
滴加終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，輕微震蕩板面混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測定吸光度，計算樣本 iNOS 表達(dá)水平。
關(guān)鍵字： 大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶;iNOS;ELISA試劑盒;
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