本試劑盒依托競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)原理，將5羥基吲哚乙酸偶聯(lián)抗原包被于微孔板，實(shí)驗(yàn)中加入待測(cè)樣本、標(biāo)準(zhǔn)品及特異性一抗，樣本中的5-HIAA與固相偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合一抗，孵育平衡后洗板去除游離物質(zhì)，加入酶標(biāo)記二抗孵育結(jié)合，充分洗滌后加入底物液?jiǎn)?dòng)顯色反應(yīng)，顯色深淺隨樣本中5-HIAA濃度升高而降低，通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度數(shù)值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程，可精準(zhǔn)定量樣本中5羥基吲哚乙酸的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
英文名稱：5-HIAA ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2692
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)值0.2μmol/L，適配神經(jīng)遞質(zhì)代謝產(chǎn)物微量檢測(cè)
檢測(cè)范圍：0.5μmol/L - 15μmol/L，覆蓋人體體液正常代謝含量區(qū)間
反應(yīng)時(shí)間：標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)時(shí)長100分鐘，溫育、顯色步驟標(biāo)準(zhǔn)化
保存條件：2-8℃密封避光保存，顯色液、終止液分開存放，避免混放反應(yīng)
有效期：未開封有效期8個(gè)月，開封后試劑30天內(nèi)使用完畢
特異性：特異性識(shí)別5羥基吲哚乙酸，與吲哚乙酸、5羥色胺無交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%，批量檢測(cè)穩(wěn)定性好
注意事項(xiàng)：尿液、血清樣本需預(yù)處理去除雜質(zhì)，避免代謝物干擾；實(shí)驗(yàn)溫度恒定37℃，禁止超時(shí)顯色，防止數(shù)值偏高
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
樣本前處理：尿液樣本按試劑盒說明稀釋，離心去除沉淀物；標(biāo)準(zhǔn)品粉劑溶解后梯度稀釋配制標(biāo)準(zhǔn)系列。
上樣加液：空白孔添加樣本稀釋液 50μL；標(biāo)準(zhǔn)品孔加梯度標(biāo)準(zhǔn)液 50μL；待測(cè)孔加入處理后尿液樣本 50μL。
一步添加酶結(jié)合物：所有孔加入酶標(biāo)記抗體液 100μL，覆膜密封酶標(biāo)板。
溫育孵育：37℃避光孵育 50min，靜置孵育不晃動(dòng)。
洗板除游離物：棄液洗板，每孔浸洗 35s，重復(fù) 5 次，徹底拍干。
避光顯色：每孔加顯色 A、B 液各 50μL，37℃顯色 13min。
終止測(cè) OD：加入終止液，酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，計(jì)算樣本 5-HIAA 濃度。
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關(guān)鍵字： 人5羥基吲哚乙酸;5-HIAA;ELISA試劑盒;
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