本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心ELISA檢測原理，微孔板預先固定純化的人5脂加氧酶捕獲抗體，加入標準品與待測樣本后，樣本中的5-LO抗原與固相抗體特異性結合，孵育洗滌去除未結合雜質，再加入酶標記的5-LO檢測抗體，形成特異性免疫夾心復合物，經(jīng)充分洗滌去除多余酶標抗體，加入底物顯色液進行酶促顯色，產(chǎn)物顏色深淺與樣本中5-LO蛋白含量呈正相關，終止反應后檢測吸光度，對照標準曲線即可完成5脂加氧酶的定量檢測。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒

英文名稱：5-LO/LOX Elisa Kit
貨號：Y-E3028

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測值0.06ng/mL，適配炎癥通路關鍵酶低豐度檢測

檢測范圍：0.1ng/mL - 45ng/mL，覆蓋炎癥正常及激活表達區(qū)間

反應時間：完整實驗反應時長95分鐘，操作簡便高效

保存條件：2-8℃避光冷藏保存，抗體試劑嚴禁高溫，洗滌液常溫保存

有效期：未開封有效期7個月，開封后1個月內用完

特異性：特異性識別人5脂加氧酶，與其他脂加氧酶亞型無交叉結合反應

重復性：板內CV≤8%，板間CV≤11%，滿足科研實驗誤差標準

注意事項：組織、細胞樣本需充分裂解，去除雜質；洗板步驟需徹底，避免非特異性吸附，實驗試劑禁止跨批次混用
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

樣本處理：細胞裂解液上清離心去除雜質，原液可直接檢測；標準品溶解后梯度稀釋制備標準曲線液。

加樣上板：空白孔加入基礎稀釋液 50μL，標準品孔、樣本孔各加對應液體 50μL。

一步添加酶標檢測液：所有孔加入酶標記特異性抗體 100μL，封板密封。

孵育反應：37℃避光孵育 75min。

洗板操作：棄去孔內液體，洗滌液加滿浸泡 40s，洗板 6 次，吸干水分。

顯色步驟：顯色 A、B 液各 50μL 每孔，避光顯色 19min。

終止讀數(shù)：加終止液 50μL，450nm 測定 OD 值，計算樣本 5-LO 含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：