本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理開展檢測，酶標(biāo)板微孔預(yù)先包被大鼠ACS特異性單克隆抗體。檢測過程中，樣本及標(biāo)準(zhǔn)品中的大鼠ACS抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除未結(jié)合成分后，加入HRP標(biāo)記的ACS檢測抗體，形成穩(wěn)定的夾心免疫復(fù)合物。隨后加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色反應(yīng)，顯色程度與樣本中ACS含量成正比，終止反應(yīng)后檢測微孔吸光度值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量分析大鼠樣本中脂酰輔酶A合成酶的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脂酰輔酶A合成酶(ACS)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1062 |
英文名稱 | ACS ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.3ng/mL
檢測范圍：0.6ng/mL - 80ng/mL
反應(yīng)時間：總反應(yīng)120分鐘（37℃孵育60min、酶孵育30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃冷藏保存，試劑開封后分類密封存放
有效期：12個月
檢測波長：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)Logistic擬合，標(biāo)準(zhǔn)曲線R2≥0.990
注意事項：實驗試劑需充分混勻，避免試劑濃度不均導(dǎo)致檢測偏差，嚴(yán)格控制孵育時長
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
1. 試劑盒試劑室溫平衡 30min，稀釋濃縮洗滌液制備工作液，組織樣本勻漿離心取上清，準(zhǔn)備酶標(biāo)板劃分孔組。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品孔上樣 50μL 梯度 ACS 標(biāo)準(zhǔn)品，檢測孔加入 50μL 待測上清液，空白孔補(bǔ)稀釋液。
3. 各孔加入酶標(biāo)記抗體工作液 100μL，封板密封，37℃恒溫孵育 50min。
4. 倒掉孔內(nèi)液體，洗滌液洗板 6 輪，每輪浸泡 30s，拍干微孔內(nèi)液體。
5. 避光依次加入顯色底物 A、B 各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 17min。
6. 加入終止液 50μL / 孔，搖晃酶標(biāo)板混勻終止顯色。
7. 450nm 測 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 ACS 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠脂酰輔酶A合成酶;ACS;ELISA試劑盒;
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