本試劑盒采用成熟的雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標(biāo)板微孔內(nèi)固定有純化的大鼠NE特異性捕獲抗體。孵育時，待測樣本、梯度標(biāo)準(zhǔn)品中的大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶可與固相抗體特異性結(jié)合，洗板清除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的NE檢測抗體，完成特異性免疫結(jié)合。經(jīng)TMB底物顯色、終止液終止反應(yīng)后，吸光度數(shù)值與樣本中NE含量呈正相關(guān)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中NE的表達(dá)水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1193 |
英文名稱 | NE ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤0.2ng/mL
檢測范圍：0.4ng/mL - 60ng/mL
反應(yīng)時間：總反應(yīng)130分鐘（樣本孵育70min、酶反應(yīng)30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃避光冷藏，禁止冷凍，避免酶蛋白失活
有效期：12個月
檢測波長：450nm/630nm雙波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：六梯度標(biāo)準(zhǔn)品擬合曲線，R2≥0.992
注意事項：樣本避免溶血、炎癥雜質(zhì)污染，洗板需徹底，減少非特異性吸附
關(guān)鍵注意事項：
實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
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實驗操作流程：
1. 所有試劑室溫放置 25min，稀釋洗滌液，待測樣本避免溶血，拆分酶標(biāo)板預(yù)留實驗孔，剩余密封冷藏。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度 NE 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加 50μL 待測樣本，空白孔加入稀釋液 50μL。
3. 每孔加入酶結(jié)合工作液 100μL，封板封口，震蕩混勻，37℃孵育 62min。
4. 棄液洗板 5 次，每次洗滌液浸泡 35s 后甩干，最后拍干微孔。
5. 避光加顯色 A、B 液各 50μL，37℃避光顯色 13min。
6. 每孔加入終止液 50μL，充分混勻終止反應(yīng)。
7. 450nm 波長讀數(shù)，計算樣本中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶濃度。
關(guān)鍵字： 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶;NE;ELISA試劑盒;
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