本試劑盒以雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術為核心，酶標板微孔預先包被大鼠TNFsR-Ⅰ特異性抗體。孵育過程中，樣本、標準品中的大鼠TNFsR-Ⅰ抗原與固相抗體特異性結合，洗滌清除未結合物質(zhì)后，加入HRP標記的TNFsR-Ⅰ檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫夾心復合物。通過TMB底物顯色反應生成有色產(chǎn)物，產(chǎn)物吸光度大小對應樣本中TNFsR-Ⅰ的含量高低，終止反應后檢測吸光度，依據(jù)標準曲線即可完成定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1529 |
英文名稱 | TNFsR-Ⅰ ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測濃度≤5.0pg/mL
檢測范圍：10pg/mL - 300pg/mL
反應時間：總反應130分鐘（孵育70min、酶孵育30min、顯色30min）
保存條件：2-8℃冷藏避光，禁止凍融試劑
有效期：12個月
檢測波長：450nm
標準曲線繪制：四參數(shù)擬合標準曲線，R2≥0.990
注意事項：洗板力度均勻，避免孔內(nèi)殘留液體，防止背景值偏高
試劑盒組成：
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物，提供酶結合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
1. 濃縮洗滌液稀釋為工作液，所有試劑室溫靜置 30min，待測樣本預處理離心取上清，酶標板按需取用。
2. 標準品孔梯度加樣 50μL TNFsR-Ⅰ 標準品，樣本孔加入 50μL 待測液，空白孔補加稀釋緩沖液。
3. 每孔加入酶標記抗體工作液 100μL，封板封口，37℃溫育 56min。
4. 棄液后洗板 6 次，每次浸泡 30s，徹底拍干微孔內(nèi)液體。
5. 避光加入顯色底物 A、B 各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 14min。
6. 滴加終止液 50μL，充分混勻終止反應。
7. 450nm 測定吸光度，標準曲線計算受體 Ⅰ 含量。
關鍵字： 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ;TNFsR-Ⅰ;ELISA試劑盒;
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