本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理,酶標板微孔預先包被高特異性大鼠TGF-α抗體。檢測時,樣本、標準品中的大鼠TGF-α抗原與固相抗體特異性結合,洗滌去除未結合組分后,加入HRP標記的TGF-α二抗進行孵育結合,形成特異性免疫復合物。經(jīng)TMB底物酶促顯色、終止反應后,溶液吸光度與樣本中TGF-α濃度呈正相關,對照標準曲線即可精準檢測樣本中轉化生長因子α的含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠轉化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1582 |
英文名稱 | TGF-α ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低檢測濃度≤2.0pg/mL
檢測范圍:5pg/mL - 150pg/mL
反應時間:總反應120分鐘(孵育60min、酶孵育30min、顯色30min)
保存條件:2-8℃避光冷藏,避免生長因子失活
有效期:12個月
檢測波長:450nm
標準曲線繪制:四參數(shù)Logistic擬合,R2≥0.992
注意事項:樣本避免反復凍融,全程低溫避光操作
關鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
1. 試劑盒所有試劑室溫平衡 30min,配制 1× 洗滌工作液,細胞培養(yǎng)上清樣本離心去除細胞碎片,按需拆分酶標板。
2. 標準品孔加入梯度稀釋 TGF-α 標準品 50μL,樣本孔加入 50μL 待測上清,空白孔加稀釋緩沖液。
3. 各孔加入酶偶聯(lián)工作液 100μL,封板膜密封,37℃溫育 60min。
4. 洗板 5 次,洗滌液浸泡 35s / 輪,甩干后吸干微孔水分。
5. 避光添加顯色底物 A、B 各 50μL,輕柔混勻,37℃避光顯色 15min。
6. 每孔加入終止液 50μL 混勻終止反應。
7. 酶標儀 450nm 讀取吸光度,擬合標準曲線得到 TGF-α 濃度。
關鍵字: 大鼠轉化生長因子α;TGF-α;ELISA試劑盒;
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