本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA技術(shù)，固相酶標(biāo)板包被人NHE3特異性抗體，加入待測(cè)樣本與梯度標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的Na+/H+交換體3蛋白與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入HRP標(biāo)記的NHE3檢測(cè)抗體，構(gòu)建特異性免疫復(fù)合物，通過(guò)底物顯色、終止反應(yīng)及吸光度檢測(cè)，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測(cè)樣本中NHE3的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒
英文名稱：NHE3 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2630
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)值0.16ng/mL，適配腎臟、腸道離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白檢測(cè)
檢測(cè)范圍：0.3ng/mL - 32ng/mL，覆蓋酸堿代謝紊亂、腎病樣本區(qū)間
反應(yīng)時(shí)間：全流程實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)98分鐘
保存條件：2-8℃避光密封保存，試劑組分穩(wěn)定無(wú)降解
有效期：常規(guī)儲(chǔ)存有效期12個(gè)月
特異性：專一識(shí)別NHE3蛋白，與其他離子交換體蛋白無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異＜7%，板間變異＜9%
注意事項(xiàng)：黏膜、腎臟組織樣本需規(guī)范處理；避免樣本雜質(zhì)干擾顯色結(jié)果
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑室溫放置 31min，配制洗滌工作液；NHE3 標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶稀釋成梯度濃度，膜蛋白提取樣本離心取上清。
酶標(biāo)板標(biāo)記孔位，每孔加樣 100μL，空白孔添加樣本稀釋液。
全部孔加入酶偶聯(lián)抗體液 100μL，混勻封板。
37℃避光孵育 66min。
重復(fù)洗板 5 輪，每次浸潤(rùn) 35s，倒扣吸干微孔液體。
TMB 顯色避光反應(yīng) 16min。
終止后 450nm 檢測(cè) OD 值，定量 NHE3 蛋白水平。
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關(guān)鍵字： 人Na+/H+交換體3;NHE3;ELISA試劑盒;
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