本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標板預先包被羅氏沼蝦諾達病毒（MrNV）特異性抗體，待測樣本中的病毒抗原與固相抗體特異性結合，洗板后加入辣根過氧化物酶標記的病毒特異性檢測抗體，形成固相抗體-病毒抗原-酶標抗體免疫復合物，底物顯色后的吸光度值與樣本中MrNV病毒含量正相關，可精準定量檢測該病毒的載量水平。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低病毒檢出效價1:90，可早期檢測羅氏沼蝦隱性MrNV病毒感染。

檢測范圍：適配蝦類組織、血清樣本中MrNV病毒抗原定量檢測，覆蓋輕癥、重癥感染濃度區(qū)間。

反應時間：總實驗時長100分鐘，水產(chǎn)病毒樣本孵育45分鐘，顯色穩(wěn)定25分鐘。

保存條件：2-8℃避光密封保存，病毒檢測試劑嚴禁冷凍、暴曬。

有效期：原裝未開封有效期12個月。

特異性：僅特異性識別羅氏沼蝦諾達病毒，與蝦類其他病毒無交叉反應。

重復性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%，水產(chǎn)疫病檢測數(shù)據(jù)可靠。

注意事項：病蝦樣本需新鮮采集，腐爛樣本會導致非特異性顯色，出現(xiàn)假陽性。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑盒室溫平衡 35min，稀釋洗滌液，設置陰陽性對照孔、標準孔與樣本孔。

羅氏沼蝦組織研磨上清稀釋處理，梯度稀釋病毒標準品，每孔加 50μL 液體樣本。

所有孔直接加入酶標記抗體工作液 100μL，封板膜嚴密密封酶標板。

37℃避光孵育 66min，固相抗體結合病毒抗原與酶標二抗。

洗板 6 次，每次洗滌液浸泡 31s，拍凈微孔內(nèi)廢液。

避光添加顯色底物液，每孔 100μL，37℃避光顯色 17min。

終止液終止顯色，酶標儀 450nm 測 OD 值，結合對照判定病毒陽性并定量病毒載量。