本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理，固相酶標板固定純化的人preptin特異性捕獲抗體，加入梯度標準品和待測生物樣本，樣本中的preptin多肽與固相抗體特異性結合，洗滌去除游離雜質后，加入HRP標記的preptin檢測抗體，構建特異性免疫復合物，經(jīng)TMB顯色、終止反應及吸光度檢測，對照標準曲線精準定量樣本中preptin的濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人preptin ELISA試劑盒
英文名稱：preptin Elisa Kit
貨號：Y-E786
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測靈敏度0.06ng/mL，適配代謝調控多肽微量檢測
檢測范圍：0.12ng/mL - 16ng/mL，覆蓋糖代謝、內分泌紊亂樣本區(qū)間
反應時間：全流程實驗時長102分鐘
保存條件：2-8℃嚴格密封避光，小分子多肽易降解，禁止久置開封
有效期：原裝密封有效期12個月
特異性：專一識別preptin多肽，無代謝類同源多肽交叉反應
重復性：板內、板間變異系數(shù)均＜8%
注意事項：樣本采集后立即低溫保存；顯色反應精準控時，避免數(shù)值偏差
試劑盒組成：
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物，提供酶結合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結合物質
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑室溫復溫 25min，按配比稀釋洗滌液，標準品溶解后配制梯度濃度，酶標板分區(qū)標記備用。
空白孔加稀釋液，標準品孔加系列濃度標品，待測孔加入待測樣本，加樣槍垂直加樣減少誤差。
一步法直接加入酶結合物工作液，無需棄除孔內液體，封板密封微孔板。
37℃避光孵育 58min，孵育臺面保持水平無傾斜。
去除封板，傾倒廢液，洗滌液加滿每孔浸泡 28s，洗板 4 次后徹底拍干微孔。
加入 TMB 顯色液，室溫避光顯色 13min，最高濃度標品孔顯色最深。
終止液混勻后上機 450nm 讀數(shù)，根據(jù)標準曲線換算 preptin 含量。
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