本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理，酶標板微孔包被抗人P-gp特異性抗體，加入標準品及待測細胞、組織樣本，樣本中的P糖蛋白與固相抗體特異性結合，充分洗滌后加入HRP標記的P-gp檢測抗體，構建穩(wěn)定的免疫復合物，經(jīng)顯色、終止反應后檢測OD值，通過標準曲線定量檢測樣本中P-gp的含量，反映腫瘤多藥耐藥水平。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒

英文名稱：P-gp   Elisa Kit
貨號：Y-E225

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度0.13ng/mL，適配腫瘤耐藥蛋白微量檢測

檢測范圍：0.26ng/mL - 28ng/mL，覆蓋腫瘤耐藥、藥物轉(zhuǎn)運相關樣本區(qū)間

反應時間：全流程實驗時長98分鐘

保存條件：2-8℃密封保存，禁止冷凍，防止膜蛋白抗原失活

有效期：未開封有效期12個月

特異性：專一識別人P-gp蛋白，無轉(zhuǎn)運蛋白家族交叉反應

重復性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均＜8%

注意事項：細胞、組織樣本充分裂解破壁；避免樣本氧化，保證抗原完整性
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

實驗前室溫平衡試劑盒 30min，稀釋洗滌液，溶解標準品并配置 5 組梯度濃度，劃分酶標板實驗組別。

空白孔添加樣本稀釋液，標準品孔加入對應濃度標品，樣本孔加入預處理待測樣本，精準加樣。

不吸取孔內(nèi)原有液體，直接添加酶標記二抗工作液，封板封閉微孔板。

37℃恒溫避光孵育 62min，孵育過程杜絕強光照射。

棄液后每孔加滿洗滌液浸泡 32s，重復洗板 5 次，吸水紙充分拍干微孔。

加入顯色 A、B 液，避光顯色 15min，梯度顯色清晰后終止反應。

終止液加入混勻，酶標儀 450nm 讀取 OD 值，定量檢測樣本 P-gp 蛋白含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：