本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，微孔板固相載體包被人T細胞受體（TCR）特異性捕獲抗體，樣本與標準品中的TCR抗原可特異性結合固相抗體，洗板去除非特異性結合成分后，加入HRP標記的TCR檢測抗體，構建固相免疫復合物，經充分洗滌后加入顯色底物發(fā)生酶促顯色反應，終止反應后通過酶標儀讀取吸光度，依據吸光度與TCR濃度的正相關關系，定量測定樣本中TCR的含量。
基本參數?：

產品名稱：人T細胞受體(TCR)ELISA試劑盒

英文名稱：TCR ELISA Kit
貨號：Y-E2839

規(guī)格：48T/96T

1.靈敏度：最低可測≤6pg/mL

2.檢測范圍：12.5pg/mL - 400pg/mL

3.反應時間：捕獲孵育 70min，二抗結合 42min，顯色 14min

4.顯色系統(tǒng)：HRP-TMB 雙組分顯色

5.檢測波長：450nm

6.特異性：識別人 TCRαβ 復合體，不結合免疫球蛋白分子

7.重復性：板內 CV＜6.2%，板間 CV＜8.8%

8.注意事項：樣本稀釋倍數建議梯度預實驗確定，避免濃度超出標準曲線區(qū)間
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

1. 試劑室溫放置 30min，稀釋洗滌液，標準品溶解稀釋制備梯度濃度，待測樣本室溫融化后混勻。

2. 設置空白、標準、樣本三類孔，標準孔加標準品 50μL，樣本孔加待測樣本 50μL，空白孔不加試劑。

3. 除空白孔外每孔添加酶標記抗體工作液 100μL，封板膜密封酶標板，水平搖晃混勻。

4. 37℃恒溫孵育 60min，孵育期間酶標板單層放置。

5. 去除封板膜，倒出孔內液體，洗滌液浸泡 30s 甩干，洗板 5 次，拍凈孔內殘留液體。

6. 避光添加顯色 A、B 液各 50μL，輕微震蕩，37℃避光顯色 15min。

7. 終止液每孔 50μL 終止反應，酶標儀檢測吸光度，通過標準曲線計算樣本 TCR 表達量。
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