本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，針對(duì)植物赤霉素（GA）建立特異性免疫檢測(cè)體系，微孔板包被GA固相抗原，樣本中的植物赤霉素與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)抗體，顯色強(qiáng)度與GA濃度呈負(fù)相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算，可定量檢測(cè)植物樣本中赤霉素的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測(cè)限0.04ng/g，可精準(zhǔn)檢測(cè)植物組織中微量赤霉素含量

檢測(cè)范圍：0.1ng/g - 200ng/g，適配植物葉片、莖稈、根系、種子組織樣本

反應(yīng)時(shí)間：全流程90分鐘，植物激素反應(yīng)體系適配性強(qiáng)

保存條件：2-8℃避光冷藏，禁止冷凍，試劑開封后密封防潮

有效期：未開封有效期12個(gè)月，儲(chǔ)存穩(wěn)定

特異性：專一識(shí)別植物赤霉素GA系列，與生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素等植物激素?zé)o交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好

注意事項(xiàng)：植物樣本液氮速凍研磨，避免激素降解；提取液需純化除雜，去除植物色素干擾；全程避光操作，底物易光解。
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過(guò)低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽(yáng)性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無(wú) DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無(wú)明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說(shuō)明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

試劑盒試劑室溫回溫 30min，稀釋洗滌液，植物組織研磨提取液過(guò)濾稀釋，酶標(biāo)板標(biāo)記空白、標(biāo)準(zhǔn)品、植物樣品孔。

標(biāo)準(zhǔn)孔加入 GA 梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液，樣品孔加入植物提取待測(cè)液，空白孔加入提取稀釋緩沖液。

一步法加入酶標(biāo)記 GA 抗原工作液，封板膜包裹酶標(biāo)板，輕微震蕩混勻。

37℃避光孵育 65min，開展競(jìng)爭(zhēng)免疫結(jié)合反應(yīng)。

棄除孔內(nèi)液體，洗板 6 次，每孔洗滌浸泡 32s，徹底拍干微孔。

顯色底物避光室溫顯色 18min，觀察標(biāo)準(zhǔn)品顏色梯度。

加入終止液混勻終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀讀取 OD 值，計(jì)算植物樣本赤霉素含量。