本試劑盒依托抗原抗體特異性結(jié)合與酶信號(hào)放大原理,采用雙抗體夾心法,微孔板預(yù)先包被人α2巨球蛋白(α2-MG)特異性抗體,樣本中的α2-MG抗原可與固相抗體特異性結(jié)合,洗板去除游離組分后,加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體形成免疫復(fù)合物,洗滌后加入顯色底物發(fā)生酶促反應(yīng),終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度,顯色強(qiáng)度與樣本中α2-MG濃度成正比,以此完成定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱(chēng):人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA試劑盒
英文名稱(chēng):α2MG Elisa Kit
貨號(hào):Y-E3136
規(guī)格:48T/96T
1.靈敏度:最小檢測(cè)≤0.3μg/mL
2.檢測(cè)范圍:0.6μg/mL - 19.2μg/mL
3.反應(yīng)時(shí)間:孵育 105min,二抗 58min,顯色 23min
4.顯色系統(tǒng):?jiǎn)纹款A(yù)混 TMB 顯色液
5.檢測(cè)波長(zhǎng):450nm
6.特異性:與人 α2-MG 四聚體結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合,無(wú)其他球蛋白交叉反應(yīng)
7.重復(fù)性:板內(nèi) CV<6.9%,板間 CV<9.7%
8.注意事項(xiàng):樣本不可反復(fù)凍融超過(guò) 3 次,大分子蛋白易降解失活
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū),不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光,避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

1. 試劑與待測(cè)樣本室溫靜置 32min 回溫,配制洗滌工作液,標(biāo)準(zhǔn)品逐級(jí)稀釋配置梯度濃度。
2. 設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品梯度孔、樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)孔加標(biāo)準(zhǔn)品 50μL,樣本孔加待測(cè)液 50μL,空白孔不加任何試劑。
3. 實(shí)驗(yàn)組每孔加入酶標(biāo)記抗體工作液 100μL,封板膜封口,緩慢搖晃酶標(biāo)板混勻反應(yīng)體系。
4. 37℃恒溫孵育 66min,孵育環(huán)境溫度穩(wěn)定不變。
5. 棄去孔內(nèi)廢液,洗滌液注滿(mǎn)每孔浸泡 32s,甩干后重復(fù)洗板 5 次,徹底洗除游離結(jié)合物。
6. 避光滴加顯色液 A、B 各 50μL,震蕩混勻,37℃避光顯色 14min。
7. 加入終止液終止酶促顯色,酶標(biāo)儀快速讀數(shù),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算 α2-MG 含量。
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關(guān)鍵字: 人α2巨球蛋白;α2-MG;ELISA試劑盒;
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