本試劑盒采用特異性雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法原理，酶標板固相包被人大腸癌專一抗原4抗體，樣本中的CCSA-4抗原與包被抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗滌去除非特異性結(jié)合物質(zhì)后，加入酶標記二抗形成夾心結(jié)構(gòu)，底物顯色終止后檢測吸光度，依據(jù)標準曲線精準定量樣本中CCSA-4的濃度水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)ELISA試劑盒
英文名稱：CCSA-4 Elisa Kit
貨號：Y-E228
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低可測 1.5U/mL
檢測范圍：4U/mL - 160U/mL
反應時間：孵育 78min，酶二抗 42min，顯色 15min，總 135min
顯色系統(tǒng)：單組分穩(wěn)定型 TMB 顯色體系
檢測波長：450nm+630nm 雙波長
特異性：與消化道其他腫瘤標志物交叉反應率＜3.5%
重復性：板內(nèi) CV＜6.9%，板間 CV＜8.1%
注意事項：洗板過程每孔洗滌不少于 5 次，防止殘留游離抗原造成背景偏高
關鍵注意事項：
實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下：
整套試劑室溫放置 38min，稀釋濃縮洗滌液，規(guī)劃板條孔位分組，標記各組孔用途。
不同濃度 CCSA-4 標準品各取 50μL 加入標準孔，待測樣本稀釋處理后上樣 50μL，空白孔添加稀釋緩沖液。
每孔加入酶標記工作液 100μL，封板嚴實封口，低速震蕩混勻 18s。
37℃密閉避光孵育 68min，保證抗原抗體充分結(jié)合。
洗板機自動洗板 6 次，單次浸泡 32s，結(jié)束后倒扣拍干板條廢液。
避光加入顯色底物 A、B 各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 21min。
終止液終止顯色，12min 內(nèi) 450nm 檢測 OD 值，標準曲線法計算 CCSA-4 數(shù)值。
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關鍵字： 人大腸癌專一抗原4;CCSA-4;ELISA試劑盒;
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