本試劑盒基于雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理定量檢測(cè)人樣本中的γ肽(Pγ)。微孔板固相表面包被有Pγ特異性捕獲抗體，加入待測(cè)樣本后，樣本內(nèi)的Pγ抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗板去除未結(jié)合的非特異性物質(zhì)。隨后加入HRP標(biāo)記的Pγ檢測(cè)抗體，與已結(jié)合的抗原形成穩(wěn)定的夾心免疫復(fù)合物，充分洗滌后加入顯色底物TMB，經(jīng)酶促反應(yīng)產(chǎn)生有色顯色產(chǎn)物，反應(yīng)終止后通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度。樣本中Pγ含量越高，形成的免疫復(fù)合物越多，顯色越深，吸光度值越高，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可定量測(cè)定樣本中Pγ的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：≤3pg/mL

檢測(cè)范圍：10pg/mL–1000pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：一抗結(jié)合 50min，酶標(biāo)二抗 40min，避光顯色 20min

顯色系統(tǒng)：TMB 雙液顯色體系

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 單波長(zhǎng)測(cè)定

特異性：不與人其他小分子活性肽發(fā)生交叉結(jié)合

重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤5.5%，板間變異系數(shù)≤7.5%

注意事項(xiàng)：全程避光操作，底物液不可混用，開(kāi)封試劑 1 周內(nèi)用完
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：

本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。

全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見(jiàn)光易失效。

移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無(wú)酶、無(wú)熱源。

孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。

洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。

終止后需快速讀數(shù)，放置過(guò)久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。

終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。

實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。

不同批次試劑盒組分不可混用。

試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

將整套試劑盒置于 22-25℃室溫放置 25min 回溫，拆封酶標(biāo)板條，按需拆分板條固定于板架，劃分標(biāo)品孔、樣本孔、空白孔。

標(biāo)準(zhǔn)品孔添加已倍比稀釋的 Pγ 標(biāo)準(zhǔn)溶液 50μL；檢測(cè)孔添加預(yù)處理后的人體生物樣本 50μL；空白孔空置不加液。

直接向除空白孔外所有孔內(nèi)加入一步法標(biāo)記抗體工作液 50μL，微量振蕩器低速震蕩 10s 混勻，覆膜封孔。

置于 37℃水浴恒溫孵育 55min，全程保持酶標(biāo)板水平放置。

揭去封板膜，倒扣酶標(biāo)板倒掉廢液，每孔注滿洗滌緩沖液浸泡 35s，強(qiáng)力拍干，循環(huán)洗板 4 次。

每孔加入顯色底物液 A 50μL、底物液 B 50μL，避光環(huán)境下?lián)u勻，37℃避光反應(yīng) 12min。

滴加終止液 50μL 終止反應(yīng)，充分混勻后，酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線換算樣本 Pγ 含量。